Ефекти от диетичните въглехидрати, заменени с див ориз (Zizania latifolia (Griseb) Turcz) върху

ibg.waykun.com - Диета и загуба на тегло, днес

Шуфен Хан

1 Катедра по хранене и хигиена на храните, Училище за обществено здраве, Югоизточен университет, 87 Dingjiaqiao Road, Нанкин 210009, Китай; Имейли: nc.ude.adus@nahfs (S.H.); moc.liamtoh@gnohgnahzhp (H.Z.)

2 Катедра по хранене и хигиена на храните, Училище за обществено здраве, Медицински колеж на Университета Сучжоу, 199 Renai Road, Суджоу 215123, Китай; Имейл: nc.ude.adus@gnaiqilniq

Хонг Джанг

Liqiang Qin

Ченгкай Джай

Резюме

1. Въведение

Приемът на храна, богата на наситени мазнини, холестерол и рафинирани въглехидрати, което е диетичният състав на жителите на азиатския регион, е широко разпространен и следователно води до разпространението на свързани с храненето хронични метаболитни заболявания в Китай, Япония и други развиващи се страни [ 1,2]. Доказано е, че инсулиновата резистентност е основният фактор, допринасящ за тези метаболитни заболявания [3,4]. В допълнение, диетичният въглехидратен източник на тази диета, базиран на състава на жителите на азиатския регион, е предимно от бял ориз и преработено пшенично нишесте, а много от полезните за здравето компоненти на непокътнати пълнозърнести зърнени култури са загубени при рафинирането. Натрупват се доказателства, че консумацията на високо пълнозърнести зърнени храни може да намали риска от затлъстяване, диабет и сърдечно-съдови заболявания [5,6,7]. Към днешна дата основният подход, използван за изследване на физиологичните функции и признатите ползи за здравето на пълнозърнестите зърнени култури, е фокусиран върху изследването на всяко изолирано съединение. Договорено е обаче да се отбележи, че това е синергичното действие на много биоактивни съединения, срещащи се в непокътнати пълнозърнести зърнени култури [8,9].

Хранителната стойност и биологичната функция на китайския див ориз е проучена задълбочено в нашата лаборатория. Понастоящем обаче механизмите му на действие за подобряване на метаболизма на глюкозата и инсулиновата резистентност не са известни. По този начин тествахме хипотезата, че WR като пълнозърнеста зърнена култура, която замества белия ориз и преработеното пшенично нишесте като основен източник на диетични въглехидрати, има благоприятен ефект върху глюкозния метаболизъм и инсулиновата резистентност при плъхове, хранени с високо съдържание на мазнини/диета с холестерол. Настоящото проучване също така установи относителната експресия на активираните от пероксизома пролифератор рецептори, алфа и гама (PPAR-α и PPAR-γ), участващи в съхранението на мазнини и чувствителността към инсулин [17] и серия адипоцитокини, включително адипонектин (ADP), нива на лептин, липокалин-2 (LCN2) и висфатин, свързани с освобождаването на инсулин и инсулиновата резистентност [18].

2. Експериментална секция

2.1. Животни и диети

Десетседмични мъжки плъхове Sprague-Dawley са закупени от Шанхайския лабораторен център за животни (Шанхай, Китай). Всички плъхове бяха настанени индивидуално в клетки от неръждаема стомана при контролирани условия на температура при 21 ± 2 ° C, относителна влажност при 55 ± 5% и цикъл 12:12 h светлина-тъмнина. След аклиматизация в лабораторните условия за 1 седмица животните бяха разделени на случаен принцип в четири диетични групи от по десет животни и хранени с различна експериментална диета, включително диета с ниско съдържание на мазнини (LF, отрицателна контролна група), високо съдържание на мазнини/холестерол (HFC), моделна група) диета, градска диета (CD) и WR диета за 8 седмици. Телесното тегло и приема на храна се записват рутинно всяка седмица през целия експериментален период. Това проучване беше одобрено от Комитета за хуманно отношение към животните в Югоизточния университет (Нанкин, Китай) и от Китайското зоологическо общество. Протоколът от разследването беше в съответствие с принципите, очертани в Китайската практика за грижа и използване на лабораторни животни.

2.2. Колекция от тъкани

Взети са кръвни проби от опашната вена след 12 часа на гладно, в началото и 4-та и 6-та седмица от периода на хранене. На 8-ата седмица на гладно за една нощ (12 часа) се дава лека етерна анестезия и се събира кръв от коремната аорта, последвано от центрофугиране при 3000 rpm в продължение на 10 минути за отделяне на серума. Черният дроб и мастната тъкан на епидидима незабавно се събират, претеглят, замразяват в течен азот и след това се съхраняват при -80 ° C до анализ.

2.3. Биохимичен анализ

Концентрацията на гладен инсулин (FINS) се определя с комплект за радиоимуноанализ (Chemclin Biotech Co., Ltd., Пекин, Китай). Нивото на кръвната глюкоза на гладно в серума (FBG), концентрацията на триглицериди на хомогенат в черния дроб (TG) и концентрациите на свободни мастни киселини (FFA) бяха измерени с помощта на търговски диагностични комплекти (Jiancheng Bioingineering Institute, Nanjing, China). Оценката на модела на хомеостазата (HOMA) се използва в настоящото проучване за оценка на инсулиновата резистентност (HOMA-IR) и индексът се изчислява съгласно докладваната формула [23]. Серумните ADP, LCN2 и висфатин се определят чрез сандвич ELISA методите, използвайки търговски комплекти за плъхове, в съответствие с инструкциите на производителя.

2.4. Анализ на обратна транскрипция-полимеразна верижна реакция (RT-PCR)

Чернодробните и епидидималните мастни тъкани от всички групи се събират и съхраняват в разтвор на RNAlater (Qiagen Co., Ltd., Шанхай, Китай). Общата РНК се изолира, като се използва разтвор на Trizol (Invitrogen, САЩ), съгласно инструкциите на производителя. Впоследствие 1 μg от общата РНК на всяка проба беше обратно транскрибирана в кДНК чрез обратна транскриптаза на вируса на миша левкемия на млада мишка (M-MuLV) (Fermentas Co., MBI, USA). Относителното изобилие на гени на адипонектинов рецептор 2 (AdipoR2), PPAR-α и PPAR-γ в чернодробните тъкани и лептин в епидидимни тъкани бяха количествено определени чрез метода RT-PCR в 25 μL PCR реакция. Броят на PCR циклите е 30 за всеки. β-актинът служи като вътрешен контрол. Нивата на генна експресия се нормализират до оптичната плътност на β-актина във всяка проба. Последователностите на PCR праймери за всеки ген се синтезират в търговската мрежа (Sangon Biotech, Co., Шанхай, Китай) и последователностите са показани в Таблица 1 .

маса 1

Поредици от грундове.

PrimerSense (5′ – 3 ′) Antisense (5′ – 3 ′) Размер (bp)

β-актин	GAAATCGTGCGTGACATTAAG	GCTAGAAGCATTTGCGGTGGA	511
AdipoR2	TGCGCACACGTTTTCAGTCTCCT	TTCTATGATCCCCAAAAGTGTGC	150
PPAR-α	AGGCTATCCCAGGCTTTGC	GCGTCTGACTCGGTCTTCTTG	487
PPAR-γ	TCCGTGATGGAAGACCACTC	CCCTTGCATCCTTCACAAGC	532
Лептин	CCCATTCTGAGTTTGTCCA	GCATTCAGGGCTAAGGTC	301

2.5. Анализ на Western Blot

2.6. Статистически анализ

Всички данни са изразени като средна стойност ± SD. Всички анализи бяха извършени с помощта на пакети за статистически анализ на SPSS версия 13.0 (SPSS Inc., Чикаго, IL, САЩ). Значимостта на разликата се оценява чрез дисперсионен анализ (ANOVA), последван от post hoc тест на Tukey. Разликите се считат за значими в p Таблица 2). На четвъртата седмица телесното тегло на плъхове, хранени с HFC диета (424,32 ± 15,13 g), е значително по-голямо от това на дадена LF диета (409,12 ± 11,82 g) (p = 0,013). След осем седмици диетично хранене, плъховете, хранени с WR диета, имат значително по-ниско наддаване на тегло от плъховете, хранени с CD и HFC диета, но не е установена значителна разлика между CD и HFC групите. В сравнение с плъховете, хранени с LF диета, плъховете, хранени с HFC диета, показват повишено относително чернодробно тегло, концентрации на TG и FFA в чернодробния хомогенат. Плъховете, хранени с CD, показват сходно относително чернодробно тегло и чернодробни липиди, както и тези, хранени с HFC диета. Въпреки това, в сравнение с CD, диетата WR намалява относителното тегло на черния дроб, нивата на TG и FFA на чернодробния хомогенат.

Таблица 2

Наддаване на тегло, относително тегло на черния дроб и липиди в черния дроб, според четири диетични групи.

Популярен

Те четат сега