Изследователска работа

  • Пълен член
  • Цифри и данни
  • Препратки
  • Цитати
  • Метрика
  • Препечатки и разрешения
  • PDF

РЕЗЮМЕ

Въведение

Грипният вирус ежегодно заразява до 20% от световното население и причинява до един милион смъртни случаи. Грипните пандемии, които се срещат средно три или четири пъти на век и се характеризират с много бързо разпространение, засягащи цели континенти или целия свят, представляват сериозна заплаха за човечеството. 1, 2 Превантивната ваксинация остава основното оръжие срещу грипа като най-ефективният, безопасен и икономически обоснован начин за превенция. Променливостта на грипния вирус води до необходимостта от постоянно обновяване на щамовете в състава на ваксините. Световната здравна организация (СЗО) прилага световно наблюдение за грип, събирайки информация за циркулиращи и потенциално пандемични вируси и давайки годишни препоръки относно кандидатите за ваксини на производителите на ваксини. 3, 4

ваксина

В страните от Централна Азия няма производители на противогрипни ваксини. Република Казахстан ще бъде първата сред тях, която ще произведе свои собствени противогрипни ваксини, включително пандемични. 5, 6 Инактивирана алантоисна сплит ваксина срещу сезонен грип (RIBSP ваксина) за сезонна грипна профилактика е разработена в Изследователския институт по проблемите на биологичната безопасност. 7, 8 Тази ваксина се произвежда лесно и е доказано, че е безопасна и силно имуногенна. 9–11 Прилагането на RIBSP ваксина без адюванти и консерванти я прави различна от предлаганите на пазара ваксини. Ние вярваме, че компонентите на ежегодно прилаганите противогрипни ваксини (алуминиев хидроксид, тиомерсал и др.), Натрупващи се при хората, могат да бъдат здравен рисков фактор. 12–14 RIBSP беше получател на СЗО и получи финансиране от глобалния план за действие за увеличаване на предлагането на противогрипна ваксина. Това беше изключително важна инициатива, насочена към създаване на капацитет за производство на противогрипни ваксини в страните с ниски и средни доходи, така че тези страни да са независими от доставките на ваксини от страни с високи доходи (особено в случай на пандемия). 15

Предишните предклинични и фаза I клинични изпитвания на ваксината RIBSP показаха отлични резултати в сравнение с разделената ваксина VAXIGRIP®. 10, 11

Клиничното проучване на фаза I на ваксината при здрави индивиди на възраст под 50 години показва добър безопасен профил. Хуморалният имунен отговор към ваксината отговаря на три изисквания на Европейския комитет към ваксините срещу човешки грип (CPMP/EWP/214/96). 11, 16 21 дни след ваксинацията (DPV) степента на сероконверсия е 100,0% за грипния вирус A/H1N1pdm09, 95,5% за грипния вирус A/H3N2 и 81,8% за грипния вирус. Нивото на серопротекция срещу грипните вируси A/H1N1pdm09, A/H3N2 и тип В е съответно 95,5%, 86,3% и 72,7. Средногеометричните титри (GMT) на антителата на 21 DPV са 175,7 за грипния вирус A/H1N1pdm09, 64,2 за грипния вирус A/H3N2 и 37,6 за грипния вирус. 11.

Резултатите от фаза II клинични изпитвания на ваксината RIBSP са обещаващи за оптимизиране на производството на грипна ваксина за страните със средни или ниски доходи и могат да допринесат значително за глобалната програма за превенция на грипа.

Резултати

Предмет на разположение

Между 24 октомври 2016 г. и 3 ноември 2016 г. бяха изследвани 441 субекта; ваксинацията започна на 26 ноември 2016г.

Скринингът показа, че 150 пациенти на възраст между 18 и 60 години отговарят на критериите за включване в клиничното изпитване на ваксините RIBSP (100 пациенти) и VAXIGRIP® (50 пациенти).

След подписване на писмен формуляр за информирано съгласие, съдържащ информация за проучването, както и за всички аспекти и процедури, 150 субекти бяха рандомизирани в групи и ваксинирани с RIBSP ваксина и VAXIGRIP® като сравнителна ваксина. Всички 150 субекта са участвали в анализите на имуногенността и безопасността на ваксините; никой от тях не е спрял неговото/нейното участие или е изключен от изпитването през целия период на изследване са показани на фиг. 1. Няма значителни разлики във възрастта, пола, теглото и ръста на участниците и в двете групи (Таблица 1).

Публикувано онлайн:

Фигура 1. Блок-схема на изследването.

Фигура 1. Блок-схема на изследването.

Публикувано онлайн:

Таблица 1. Обобщение на демографските данни.

Имуногенност

Алантоисната инактивирана разделена ваксина RIBSP и ваксината VAXIGRIP® показват подобна имуногенна активност. Имуногенността се определя от титрите на антителата за хемаглутинин в HAI.

На 21 DPV сероконверсия към грипен вирус A/H1N1pdm09 е регистрирана при 87,0% от пациентите в групата на ваксина RIBSP; към грипен вирус A/H3N2 - в 63,0% и към грипен вирус B - в 59,0%. В групата VAXIGRIP® процентът на субектите със сероконверсия е бил 80,0% към грипен вирус A/H1N1pdm09; 60,0% до грипен вирус A/H3N2 и 56,0% до грипен вирус.

Нарастването на титъра на антителата сред доброволци, ваксинирани срещу RIBSP, е 23,3 за грипен вирус A/H1N1pdm09; 4.4 за грипен вирус A/H3N2 и 4.5 за грипен вирус. В групата VAXIGRIP® тези параметри са съответно 13,4, 5,2 и 4,4 за всеки компонент на ваксината.

Нивото на серопротекция сред доброволците от ваксиналната група RIBSP е 95% за грипния вирус A/H1N1pdm09; 84% за грипния вирус A/H3N2 и 80% за грипния вирус. Сред тези, които са получили VAXIGRIP® ваксина ниво на серопротекция е съответно 96%, 88% и 80% за вируси A/H1N1pdm09, A/H3N2 и грип В.

Не е установена статистически значима разлика в нивата на серопротекция на инактивираната алантоисна разделена RIBSP ваксина и ваксината VAXIGRIP® (P> 0,01, F-критерий). Стойностите на F-критерия в сравнение с разликата в надеждността при групи доброволци са показани в таблица 2 за всеки компонент на ваксините.

Публикувано онлайн:

Таблица 2. Скорости на сероконверсия и серопротекция в две ваксинирани групи.

Безопасност

Профилът на безопасност се оценява като дял на субектите, които изпитват нежелани събития (AE). Непосредствените локални нежелани събития (ILAE) в рамките на 2 часа след ваксинацията са показани в Таблица 3. ILAE са съобщени при 2 субекта от групата на ваксините VAXIGRIP® и само при 1 субект от групата на ваксините RIBSP. Най-честият локален симптом и в двете групи е уплътняването на мястото на инжектиране.

Публикувано онлайн:

Таблица 3. Нежелани събития в рамките на 21 дни след ваксинацията.

Регистрираните локални AE през първите 7 дни след ваксинацията са подобни на непосредствените локални AE. Системни реакции са демонстрирани от 5 субекта в групата VAXIGRIP® и 2 субекта в групата RIBSP. Най-честите местни симптоми са както следва: втвърдяване, болезненост и хиперемия на мястото на приложение на ваксината; нямаше разлики в тези реакции между групите. Всички регистрирани реакции са категоризирани като леки и самоограничаващи се и не се нуждаят от лечение.

От 8-ия до 20-ия ден на изследваните субекти от двете групи регистрираха системни AE с еднаква честота: 10,0% при RIBSP и 12,0% при група VAXIGRIP®. Симптомите, характерни за остри респираторни вирусни инфекции (ARVI), са най-чести. Разкритата честота на симптомите на ARVI може да се обясни с по-висока заболеваемост през есенния период. Повечето нежелани събития са леки. Един от участниците, ваксинирани с VAXIGRIP®, е имал треска (38,5 ° С) на фона на ARVI от 14 до 16 DPV. Фебрилността се счита за AE с умерена тежест, която не е свързана с ваксинация.

Промени в лабораторните стойности след ваксинация (общи клинични и биохимични кръвни анализи) са регистрирани на 3, 7 и 21 ден в двете групи; честотата на лабораторните отклонения е сравнима между 2 групи. Промените в лабораторните стойности са разкрити за 29% от субектите, имунизирани с ваксината RIBSP и 26% от реципиентите на VAXIGRIP®. Всички тези нежелани реакции са били леки и единични (един повишен показател) в повечето случаи. Увеличение на броя на лимфоцитите е регистрирано на 7 и 21 ден за 1 доброволец от групата VAXIGRIP®; друг участник от същата група демонстрира увеличаване на броя на еозинофилите на 3 и 7 ден и намаляване на броя на лимфоцитите на 7 и 21 ден. Няма резултати от патологични открития в резултатите от теста на урината.

По време на проучването не са регистрирани сериозните нежелани събития.

Дискусия

Това проучване се финансира и провежда въз основа на заповеди на Министерството на образованието и науката и Министерството на здравеопазването на Република Казахстан за предоставяне на обществеността на собствена сезонна противогрипна ваксина за ежегодна ваксинация. Получените резултати показват висока имуногенност и добра поносимост на ваксината при възрастни на възраст между 18–60 години.

Имуногенността се оценява в сравнение с ваксината VAXIGRIP®, серологичните анализи се извършват чрез сравняване на нивата на антителата в двойките серумни проби, събрани преди ваксинацията и на 21-ва DPV. Статистически надеждно увеличение на титрите на антителата е регистрирано при ваксинирани субекти от двете експериментални групи. 17, 18

Процентът на участниците с 4-кратно и по-високо увеличение на титрите на антителата (индекс на сероконверсия) е важна характеристика на имунния отговор на ваксинацията. Най-високият индекс на сероконверсия (87,0%) е демонстриран за ваксината RIBSP срещу компонента на грипния вирус A/H1N1. Той е със 7% по-висок от същия показател, демонстриран за ваксина VAXIGRIP®. 19, 20 Индексите на сероконверсия на ваксината RIBSP към компоненти на грип A/H3N2 и В също надвишават показателите, демонстрирани от VAXIGRIP®. Тези резултати позволиха да се заключи, че наблюдаваното повишаване на титъра на антителата към всички компоненти на ваксината срещу грипния вирус значително надвишава критериите CPMP/EWP/214/96, които изискват индексът на сероконверсия да бъде над 40%. 16, 21, 22

Не е разкрита значителна разлика в увеличаването на титъра на антителата между ваксините RIBSP и VAXIGRIP®.

В групата на RIBSP средното увеличение на титъра на антителата за грипния вирус A/H1N1 е 23,3; за грипния вирус A/H3N2 - 4,4 и за грипния вирус B - 4,5, като по този начин отговаря на изискванията на Европейския комитет за грипни ваксини (СPMP/BWP/214/96), според който този индекс трябва да бъде не по-малък от 2,5.

Скоростта на серопротекция е била най-малко 80% за всички компоненти на ваксината и в двете групи, като най-високата е за грипния вирус A/H1N1. Степента на ваксина VAXIGRIP® е била значително по-висока от тази на ваксината RIBSP в този случай.

В съответствие с указанията CPMP/BWP/214/96 относно имуногенността на противогрипните ваксини, ваксината се счита за имуногенна, когато отговаря на поне един от критериите. Така че, въз основа на резултатите от изследването, RIBSP ваксината без никакви консерванти и адюванти като активатори на имунитета може да бъде препоръчана за имунна защита срещу сезонен грип чрез еднократна ваксинация за лица на възраст 18–60 години. 23, 24

RIBSP ваксината по отношение на нейната безопасност се понася добре и не предизвиква неочаквани нежелани събития и реакции. Реактогенността и честотата на нежеланите събития в случай на ваксина RIBSP не са имали значителна разлика спрямо ваксината VAXIGRIP®. Индурациите, хиперемията, отоците и болезнеността на местата на инжектиране са най-честите реакции. Всички регистрирани локални реакции са леки, предвидени и типични за ваксиниране с противогрипни ваксини.

Следвайки споменатата по-горе хипотеза, че в случай на годишна имунизация срещу грип е възможно да се избегне включването на адюванти и консерванти в състава на ваксината преди всичко заради нейната безопасност, ваксината от този вид може да се използва при деца след извършване на подходящи клинични изпитвания. Второто предимство е осъществимостта на производството му поради по-малък брой стъпки и подходящи аналитични изпитания. Имайки предвид всичко споменато по-горе, изследователите на RIBSP разработиха ваксината срещу сезонен грип. 25, 26

Процентът на грипната заболеваемост може да бъде намален чрез обща годишна ваксинация. Регистрацията на вътрешна противогрипна ваксина в Казахстан ще позволи намаляване на икономическите загуби поради огнища на грип и освен това ще допринесе значително за глобалната програма за профилактика на грипа.

материали и методи

Уча дизайн

Това беше фаза II рандомизирано, сляпо проучване (VSI-II-01/2016) на сезонната грипна сплит ваксина, проведено в Клиничния фармакологичен институт на SDAsfendiyarov, Казахски национален медицински университет, Алмати, Казахстан, в периода 24 октомври - ноември 26, 2016 г. Изпитването е регистрирано на идентификатора ClinicalTrials.gov NCT 03016143 и е проведено в съответствие с Етичния кодекс на Декларацията на Световната медицинска асоциация от Хелзинки и Насоките за добра клинична практика на Международния съвет за хармонизация.

Клинично проучване съгласно протокола „Рандомизирано сляпо сравнително клинично изпитване, фаза II, на алантоисна инактивирана разделена ваксина срещу сезонен грип при здрави възрастни” е проведено с разрешение на Министерството на здравеопазването на Република Казахстан (заповед № 322 от 24 октомври, 2016 г.), одобрен от Централната комисия по етика и Местния комитет на Казахския национален медицински университет (протокол № 2 от 21 септември, Етика 2016 г.).

Участници

Проучването включва 150 субекта на възраст 18–60 години, които са разделени на случаен принцип в съотношение 2: 1, за да бъдат ваксинирани или с RIBSP, или с VAXIGRIP® (сравнителна) ваксина. Основните критерии за изключване бяха, както следва: алергични реакции към албумин от пилешки яйца, тежко хронично или остро заболяване, значителна имунна недостатъчност, синдром на Guillain-Barré (остър полирадикулит) в анамнезата, ваксинация срещу грип през сезон 2015/2016, положителни тестове за бременност и нежелание да се използват контрацептиви по време на пробния период (за жени), автоимунни нарушения, използване на антивирусни препарати, участие във всяко друго клинично проучване през последните три месеца. Всеки доброволец подписва писмено информирано съгласие и участва в проучването.

Ваксини и ваксинация

Наименование на тестваната ваксина: Течна алантоисна инактивирана разделена ваксина срещу сезонен грип (ваксина RIBSP), произведена върху пилешки ембриони, тривалентна инактивирана разделена ваксина.

Търговската налична тривалентна инактивирана разделена ваксина срещу сезонен грип VAXIGRIP® (Sanofi Pasteur SA, Лион, Франция) беше използвана като препарат за сравнение. Една доза (0,5 ml) от двете ваксини съдържа 15 μg хемаглутинин от всеки щам на грипния вирус, препоръчан от СЗО за грипния сезон в Северното полукълбо за годините 2016–2017: A/California/7/2009 (H1N1) pdm09, A/Hong Kong/4801/2014 (H3N2), B/Brisbane/60/2008 и спомагателни вещества. Вирусите за производство на ваксини RIBSP са получени от Националния институт по биологични стандарти и контрол. Ваксината се различава от наличните в търговската мрежа ваксини по липса на тиомерсал, консерванти и адюванти.

Всички субекти бяха инжектирани интрамускулно с 1 доза ваксина в делтоидния мускул. Продължителността на периода на наблюдение е 21 ден.

Рандомизация и маскиране

Между 26 октомври - 03 ноември 2016 г. изследователите разпределиха на случаен принцип допустими участници (2: 1) за интрамускулно инжектиране на доза от 0,5 ml от ваксиналната група RIBSP или ваксиналната група VAXIGRIP®. Рандомизацията беше направена с последователно номерирани, непрозрачни, запечатани пликове, отворени от клиничния лекар при записване. Променливи блокове (блокови размери от два до осем) в последователността на рандомизацията осигуряват прикриване на разпределението. Участниците и имунолозите бяха маскирани за разпределение на лечението, което беше постигнато чрез дизайна на сдвоеното плацебо.

Оценка на имуногенността

За оценка на имуногенността се взема проба от кръв в обем 3–5 ml от всеки субект преди ваксинацията (Ден 1) и след приключване на пробата (21 Ден). HAI анализите се провеждат в Института за изследване на грипа, Санкт Петербург, Русия, като се използват 0,5% пилешки еритроцити с 4 хемаглутининови единици на 25 µl вирус въз основа на препоръчаната от СЗО процедура. 15

делът на пациентите, постигнали титър на инхибиране на хемаглутинацията (HI) ≥ 40 или титър на единична радиална хемолиза (SRH)> 25 mm, трябва да бъде 70% (серопротектиран);

брой сероконверсии или значително увеличение на титъра на антихемаглутининовите антитела> 40% (сероконвертирано)

увеличение на средния геометричен титър (GMT)> 2.5.

Оценка на безопасността

В рамките на дни от 7 до 21 всеки доброволец регистрира присъствието/отсъствието на нежелани събития в своята дневник на самонаблюдението. Субектите бяха помолени да информират изследователя за всяко сериозно нежелано събитие, настъпило до 21 дни след ваксинацията.

Статистически анализ

Точният метод на Clopper-Pearson беше използван за изчисляване на 95% доверителни интервали. Статистическият анализ на данните е извършен с помощта на безплатния софтуер R Studio.

Биохимичните и хематологичните параметри на периферната кръв на 3-та, 7-ма и 21-ва DPV са сравнени със същите параметри на 1-ви ден преди ваксинацията чрез тест Dannette, който представлява модификация на t-теста на Student за множество сравнения с една контрола.

Ефектът на алантоисната инактивирана грипна ваксина върху биохимичните и хематологичните параметри на периферната кръв беше сравнен с ефекта на ваксината VAXIGRIP® върху същите параметри с помощта на непараметричен тест на Mann-Whitney U.