Sakine Babaei

1 Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Тарбиат Модарес, Техеран, Иран;

млечице

Шаебан Рахими

1 Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Тарбиат Модарес, Техеран, Иран;

Мохамад Амир Карими Торшизи

1 Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Тарбиат Модарес, Техеран, Иран;

Голамосеин Тахмасеби

2 Отдел за изследване на пчелите и копринените буби, Институт за научни изследвания на животните, Карадж, Иран.

Seyed Naser Khaleghi Miran

1 Катедра по птицевъдство, Земеделски факултет, Университет Тарбиат Модарес, Техеран, Иран;

Резюме

Оценен е ефектът на етаноловия екстракт от прополис, пчелно млечице, мед и пчелен прашец в сравнение с виргиниамицин (като антибиотик, стимулиращ растежа) по отношение на ефективността и имунната система на японските пъдпъдъци. Използвахме 256 пилета пъдпъдъци от смесен пол в напълно рандомизиран дизайн чрез осем обработки, включително контрол, етанолов екстракт от прополис 1000 (PE1) и 5000 (PE2) mg kg -1, прашец на прах 1000 (PO1) и 5000 (PO2) mg kg -1, пчелно млечице 100 mg kg -1 (RJ), мед 22 g L -1 питейна вода (H) и виргиниамицин 150 mg kg -1 (V) и четири копия на осем птици във всяка репликация за 42 дни . Имаше значителни разлики в наддаването на тегло (WG), приема на фураж (FI) и съотношението на преобразуване на фуража (FCR) между експерименталните групи. В допълнение, WG при V лечение (18,82%), H и PO2 лечения (16,87%) и RJ лечение (12,00%) са значително по-високи от тези в контролната група (p Ключови думи: Клетъчно медииран имунитет, преобразуване на фуражи, продукти от пчелни пчели, хуморален имунитет

Въведение

Целта на това проучване е да се определи ефектът от пчелното млечице, пчелния прашец и алкохолно извлечения прополис върху производителността и имунната система на японските пъдпъдъци.

Материали и методи

Птици и животновъдство. В експеримента са включени 256 еднодневни пилета пъдпъдъци. Те бяха претеглени индивидуално и разпределени на случаен принцип за осем диетични лечения, така че всяка експериментална единица имаше еднакво средно тегло и разпределение на осем птици. Експериментални групи, състоящи се от: контролна диета (не допълнена), етанолов екстракт от прополис 1000 mg kg -1 (PE1) и 5000 mg kg -1 (PE2), прашец на прашец 1000 mg kg -1 (PO1) и 5000 (PO2) mg kg -1, пчелно млечице 100 (RJ) mg kg -1, мед 22 g L -1 (H) и виргиниамицин 150 mg kg -1 (V). Пъдпъдъчните пилета се държат в клетки (40 × 32 cm 2). Експерименталните диети се хранят от 1-42-дневна възраст. Храната и водата са били налични по желание. Диетите са формулирани въз основа на соя-царевица, за да отговарят или надвишават изискванията на NRC. 18 Експерименталните групи бяха заменени с пясък при диети по време на отглеждане. Съставът на съставките и анализът на хранителните вещества са описани в таблица 1 .

маса 1

Състав на експерименталната диета

Съставки Процент в диетата
Царевица 50,70
Соево ястие 42,52
Растително масло 2.00
Ди-калциев фосфат 0,72
Калциев карбонат 1.25
Сол 0,33
Витаминен премикс 1 0,25
Минерален премикс 2 0,25
DL-метионин 0,13
L-Треонин 0,11
Пясък 1.74
Хранителен състав
Енергия, която може да се метаболизира (Kcal kg -1 ) 2800
Суров протеин (%) 23.00
Калций (%) 0,77
Наличен фосфор (%) 0,29
Натрий (%) 0,15
Метионин (%) 0,48
Метионин + Цистеин (%) 0,85
Лизин (%) 1.28
Треонин (%) 0,98

Подготовка и екстракция на проби. Прополис, цветен прашец, пчелно млечице и мед се събират от медоносна пчела, Научноизследователски институт за животни, Карадж, Иран. Прополисът се съхранява на тъмно до обработка. Приготвя се 30,00% прополисова тинктура чрез добавяне на 600 g прополис към 1400 ml 70,00% етанол (w/v). Това се смесва и се съхранява в стъклен съд, разклаща се два пъти дневно, филтрира се след една седмица и се държи при 4 ˚С, докато се използва. 19.

производителност. Телесното тегло (BW) и приемът на фураж (FI) за репликация са записани на 21 и 42 ден и тези стойности са използвани за изчисляване на наддаване на тегло (WG), FI и преобразуване на фуража (FCR) на пилетата пъдпъдъци за периодите между дните 0-21, 21-42, както и за цялостния експеримент.

Тест за 1-хлоро-2, 4-динитробензол (DNCB). На 42-дневна възраст 1 mg mL -1 DNCB разтвор (Merck, Дармщат, Германия) се разпространява и поддържа върху 2 cm 2 площ без кожа с пера (0,05 ml) от дясната страна на двете птици на клетка. Подобно положение от лявата страна на птицата, обработена само с разтворител (ацетон: зехтин, 4: 1 v/v), за да коригира ефекта на разтворителя. Подуването на кожата се изчислява като разликата между дебелината на кожата преди и след третирането с DNCB се измерва с помощта на цифров апарат. 20.

Инжектиране на митоген . На шестседмична възраст, две пилета от всяка клетка бяха инжектирани с митоген фитохемаглутинин (PHA-M; Gibco, Гранд Айлънд, САЩ) в лявата крила, интрадермално. Всяко пиленце получи 50 μL суспензия от 50 μg PHA-M в 50 μL физиологичен разтвор, буфериран с фосфат. 21 Цифров дебеломер (Mitutoyo, Kawasaki, Япония) беше използван за измерване на дебелината на крилото преди инжектиране (като контролно измерване) и на 24 часа след инжектиране, за да се получи подуване на крилата в отговор на митогена. 22.

Хуморален имунен отговор. Ваксинацията срещу нюкасълска болест (ND) се извършва на седмия ден с използване на капки за очи (жив B1 щам; Razi Institute, Karaj, Иран) и AI H9N2 подкожно инжектиране на 21 ден (ваксини с убит нюкасъл и птичи грип; Razi Institute) на всички пилета. Като бустер, втората жива ваксина срещу ND (щам La Sota) беше проведена с питейна вода на ден 23. Имунният отговор беше оценен чрез тест за инхибиране на хемаглутинацията (HI). 23 HI титрите срещу двете ваксини бяха определени върху серумни проби от едни и същи птици на 42-ия ден. Червените кръвни клетки на овцете (SRBC) бяха събрани и промити три пъти във фосфатен буферен разтвор (PBS). Опакованите клетки бяха доведени до 5.00% в стерилен PBS разтвор. Пилетата се инжектират в гръдния мускул с SRBC (0,1 ml на пиле), последвано от бустер инжекция, съответно на 28 и 35 ден. Кръвни проби са взети на 42-ия ден. Серумът се съхранява при - 20 ˚C, докато се тества. Нивата на антителата срещу SRBC са измерени чрез HI тест. 24, 25

Определяне на теглото на тялото и лимфоидните органи . Избитите птици на 42-ия ден бяха изкормени и бурсата и далакът бяха отстранени и претеглени. Индексът на имунните органи се изразява като теглото на органа като процент от органа към общото телесно тегло.

Оценка на съотношение хетерофил към лимфоцити. Кръвни цитонамазки за диференциално броене на левкоцитите се приготвят, като се използва стандартната процедура с двуплъзгащ клин. Пробите бяха изсушени на въздух, фиксирани в метанол и оцветени с бързо оцветяване на Райт. Изследвани са цитонамазки, за да се получат броя на лимфоцитите и гранулоцитите на 100 левкоцити. Полученият брой клетки се използва за изчисляване на относителния дял на хетерофилите към лимфоцитите (съотношение H/L). 26

Статистически анализ. Данните бяха анализирани чрез процедура на генерализиран линеен модел (GLM) за напълно рандомизиран експериментален дизайн със седем обработки и четири повторения, използвайки SAS (Версия 8.2; SAS Institute, Кари, САЩ) и средните стойности бяха сравнени чрез тест на Tukey’s. Стойността на р по-малка от 0,05 се счита за статистически значима.

Резултати

PE1: 1000 и PE2: 5000 mg kg -1 етанолов екстракт от прополис, PO1: 1000 и PO2: 5000 mg kg -1 прашец на прашец, RJ: 100 mg kg -1 пчелно млечице, H: мед 22 g L -1, C: контрол и V: виргиниамицин 150 mg kg -1. SEM: Стандартна грешка на средната стойност.

Таблица 3

Сравнение между титрирането на антитела срещу вируса на New-Castle (ND), вирусите на птичия грип H9N2 (AI) и общото съотношение на червените кръвни клетки срещу овцете (SRBC) и съотношението хетерофил/лимфоцити (H/L) на японските пъдпъдъци

ЛечениеND (log 2 Здравей)AI (log 2 Здравей)SRBCH/L
PE1 6.00 a 3.50 а 1,50 б 0,16 c
PE2 3,60 б 4.25 а 1,75 аб 0,15 c
PO1 4.00 б 3,25 аб 1,75 аб 0,12 d
PO2 5.75 а 4.50 а 3,00 a 0,15 cd
RJ 3,75 б 3,75 а 2,50 аб 0,19 аб
V 3.50 б 4.00 а 1,50 б 0,22 а
З. 4,75 аб 4.50 а 2,00 аб 0,17 пр.н.е.
° С 3.50 б 2.00 б 1,50 б 0,21 а
SEM 0,1936 0,1694 0,1265 0,008
стр -стойност 0,00010,00010,00630,0001

PE1: 1000 и PE2: 5000 mg kg -1 етанолов екстракт от прополис, PO1: 1000 и PO2: 5000 mg kg -1 прашец на прашец, RJ: 100 mg kg -1 пчелно млечице, H: мед 22 g L -1, C: контрол и V: виргиниамицин 150 mg kg -1. SEM: Стандартна грешка на средната стойност.

PE1: 1000 и PE2: 5000 mg kg -1 етанолов екстракт от прополис, PO1: 1000 и PO2: 5000 mg kg -1 прашец на прашец, RJ: 100 mg kg -1 пчелно млечице, H: мед 22 g L -1, C: контрол и V: виргиниамицин 150 mg kg -1. SEM: Стандартна грешка на средната стойност.

Дискусия

Пчелното млечице съдържа много флавоноиди, органични съединения и мастни киселини. Тези компоненти могат да подобрят ефективността на растежа на пъдпъдъците, което води до повишаване на BW, FI и по-ниски FCR. Въздействието на активните съставки, особено флавоноидите, върху производителността на пъдпъдъците при стресови условия беше съобщено по-рано. 37

Резултатите от това проучване показват, че титрите на антителата в повечето лекувани групи във всеки момент от времето са били по-високи от тези на контролната група, което предполага, че те могат да насърчават хуморалния имунитет. Предишни проучвания показват, че флавоноидите имат имуносупресорен ефект върху лимфопролиферативния отговор. 43 Според това проучване микроелементите на естествената добавка към меда и пчелното млечице, добавени към питейната вода от пъдпъдъци, етаноловият екстракт от прополис и прашецът на прах, добавени към диетата, могат да подобрят работата и развитието на имунната система на японските пъдпъдъци.

От нашите резултати може да се заключи, че добавянето на H, PE2 и PO2 увеличава BW, теглото на лимфоидните органи и титъра на антителата при японските пъдпъдъци. Това може да се дължи на антимикробната и имуностимулираща активност на продуктите от пчелни пчели. Той отваря перспективни употреби на мед, прашец и прополис като фуражна добавка за подобряване на производителността на птиците.

Благодарности

Авторите искрено благодарят на Катедрата по птицевъдство, Земеделски факултет, Университета Tarbiat Modares за финансирането на този проект.