Yılmaz S 1 *, Tatli Seven P 2, Kaya E 1

1 Катедра по биохимия, Факултет по ветеринарна медицина, Университет на Фират, Елазиг, Турция.
2 Катедра по хранене на животните и хранителни болести, Факултет по ветеринарна медицина, Университет на Фират, Елазиг-Турция.

Севал Йълмаз,
Професор, Факултет по ветеринарна медицина,
Катедра по биохимия, Университет Фират, Елазиг, Турция.
Тел: +90 5363533228
Имейл: [email protected]

Получено: 29 май 2017 г .; Прието: 21 юни 2017 г .; Публикувано: 22 юни 2017 г.

Цитат: Yılmaz S, Tatli Seven P, Kaya E (2017) Ефекти от добавките на прополис, пчелно млечице, пчелен прашец и ронозим в диетите на японските пъдпъдъци (Coturnix Coturnix Japonica) върху липидната пероксидация на жълтъците. Int J Vet Health Sci Res. 5 (5), 183-189. doi: dx.doi.org/10.19070/2332-2748-1700037

Това проучване разкрива възможния ефект на прополис, пчелно млечице, пчелен прашец и добавки на ронозим при диети, които могат да бъдат полезни за японските пъдпъдъци (Coturnix coturnix japonica). Бяха използвани общо сто и шестдесет японски пъдпъдъци на 43-дневна възраст и разделени на случаен принцип в 4 повторни групи, всяка от които 32 животни. Експерименталните групи, както следва: контролната група се храни с основна диета, групата пчелно млечице се добавя към водата с диета от 500 mg/kg, групата на прополиса се храни перорално с основна диета, допълнена с диета от 4 g/kg, групата на пчелен прашец е хранене през устата с основна диета, допълнена с диета от 1 g/kg, групата Ronozyme е хранена през устата с основна диета, допълнена с диета от 1 g/kg за 74 дни. Установено е, че нивата на малондиалдехид (MDA) в жълтъка са най-високи в контролните групи, пчелното млечице и ронозимните групи в сравнение с пчелния прашец и прополисните групи (p

Пълен текст -HTML

Малондиалдехид; Жълтък; Пъдпъдъци; Прополис; Пчелно млечице; Пчелен прашец; Ронозим.

Яйцата имат висока хранителна стойност и съдържат разнообразие от необходими компоненти за поддържането и нормалната функция на човешкия организъм [1].

Окисляването на липидите от свободните радикали е един от основните механизми за влошаване на качеството на яйцата. Той се инициира във силно ненаситената фракция на мастните киселини на мембранните фосфолипиди, което води до производството на хидропероксиди, които са податливи на по-нататъшно окисляване или разлагане до вторични реакционни продукти като късоверижни алдехиди, кетони и други кислородни съединения, които могат да повлияят неблагоприятно върху липидите, пигменти, протеини, въглехидрати, витамини и цялостното качество, като причиняват загуба на вкус, цвят и хранителна стойност и ограничават срока на годност [2]. Малондиалдехидът (MDA) е един от основните продукти на липидната пероксидация. Този алдехид се образува по време на липидно пероксидиране на мастни киселини с три или повече двойни връзки [3].

Проучванията за подобряване на окислителната стабилност на яйцата и месото чрез обогатяване с диетични антиоксиданти [2, 4] разкриват обратна връзка между нивата на диетичния антиоксидант и съдържанието на MDA в жълтъка, месото, индикатор за пероксидация на липидите в продуктите от птици. В миналото синтетичните антиоксиданти са били използвани с цел предотвратяване на липидното окисление чрез извличане на пероксилни радикали, носещи вериги, или намаляване на образуването на липидни радикали [5]. През последното десетилетие се наблюдава силна тенденция към използване на органични антиоксиданти от естествени източници за защита на здравето на животните и техните продукти срещу окисляване [6]. В резултат на това възникна значителен интерес към използването на естествени добавки, които биха могли да служат като алтернатива на синтетичните добавки с цел подобряване на качеството на яйцата [7-9].

Пчелното млечице също съдържа витамини, минерали, ензими и антибиотични компоненти. Установено е, че пчелното млечице проявява различни фармакологични дейности, включително противотуморно, антимикробно, антиоксидантно действие, съдоразширяващо и хипотензивно действие, както и стимулиране на растежа и предотвратяване на инфекции, антихиперхолестеролемични и противовъзпалителни дейности.

Прополисът (пчелен клей) е естествен смолист продукт на кошера, събран от пчелите от растения, особено от цветя и листни пъпки. Прополисът обикновено съдържа 30% пчелен восък, 5% цветен прашец, 50-55% смолисти вещества и 15% етерични масла [10]. Прополисът показва различни биологични активности: антимикробна активност срещу различни бактерии и дрожди, паразити; антиоксидантна, цитотоксична и потенциална антитуморна активност, антипсориатични, противовъзпалителни и аналгетични действия, анти-затлъстяване и хепатопротективни ефекти [11, 12].

Пчелният прашец е прахообразен материал, произведен от цветен прашец, смесен с нектар и пчелен секрет и събран от медоносните пчели. Поленът се нарича единствената напълно пълноценна храна и основните биологични компоненти на пчелния прашец са производите на фенолната киселина и полифенолните съединения, най-вече флавоноидните гликозиди. Флавоноидите са така наречените вторични растителни съединения, които имат различни важни физиологични и фармакологични дейности. Те притежават разнообразни биологични свойства като антиоксидант, анти-стареене, антикарциногенен, противовъзпалителен, антиатеросклерозен, кардиопротективен и подобряват ендотелната функция [13, 14].

Включването на Ronozyme® ProAct в диетите помага за намаляване на разходите за фураж, без да се нарушава производителността. Протеинът е един от най-скъпите компоненти на всяка диета за добитък, но е от съществено значение за растежа. Следователно предизвикателството е да се използва протеин възможно най-ефективно, за да се намалят разходите за фураж, без да се накърнява здравето на животните. Протеазите са ензими, които разграждат протеиновите молекули до аминокиселините и пептидите, необходими на животните. Специално разработен за включване в диетата на животните, Ronozyme значително увеличава усвояемостта на протеините. Той допълва естествено срещащите се протеази във фуражите и значително увеличава доставката на аминокиселини и пептиди, така че да подобри производителността на животните. Подобрява усвояемостта на широк спектър от протеинови източници и зърнени култури, което позволява спестяване на разходи за диета [15].

Този експеримент е проведен, за да се изследват ефектите от добавките на пчелно млечице, прополис, пчелен прашец и ронозим в диетите на японски пъдпъдъци (Coturnix coturnix japonica) върху съдържанието на MDA в жълтъка.

Материали и методи

Бяха използвани общо сто и шестдесет японски пъдпъдъци на възраст 43 дни и разделени на 4 повторни групи, всяка от които 32 животни. Всички птици бяха поставени в клетки с вътрешни размери 40 × 32 cm. Експерименталните групи, както следва: Група 1 (контрол) е хранена с базална диета. Група 2 се добавя към водата с 500 mg/kg dietroyaljelly [16]. Група 3 е хранене с основна диета, допълнена с 4 g прополис/kg диета. Група 4 е хранене с основна диета, допълнена с 1 g пчелен прашец/kg диета [17]. Група 5 се хранеше с основна диета, допълнена с 1 g диета Ronozyme/kg. Експериментът е продължен в продължение на 74 дни.

Съставките и химичният състав на диетите са представени в Таблица 1. Химичният състав на фуражните съставки (сухо вещество, суров протеин, етерен екстракт и пепел) като изсушени проби е анализиран с помощта на AOAC [18] процедури. Храните на основата на царевица и соя са формулирани като изонитрогенни и изоенергични съгласно препоръката на NRC [19]. Всички групи бяха държани при еднакви условия на околната среда. Храната и водата се дават ad libitum.

Маса 1:

добавките

Таблица 1. Състав на съставките и химичен състав на експерименталните диети (g/kg).

Пчелното млечице и пчелният прашец са получени от търговска фирма в Турция. Пчелното млечице се разтваря в дестилирана вода и се държи замразено при -20 ° C, докато се използва. Химичният състав на пчелното млечице беше оценен чрез анализи с газова хроматография-масова спектрометрия (GC-MS, Agilent GC 6890 газов хроматограф) (Таблица 2). Ronozyme беше предоставен на DSM Nutritional Products Inc. Поленът и Ronozyme бяха хомогенно смесени внимателно с основната диета. Проби от прополис са събрани от провинция Карабюк (Средно Черно море). След това прополисните проби се съхраняват на тъмно до обработката. Пробите се екстрахират в продължение на една седмица със 100 ml 70% етанол при стайна температура, за да се получи екстрактът. След филтриране екстрактът се изпарява с помощта на вакуумен изпарител при 45 ° С и след това се използва в експеримента. GC-MS беше извършен за откриване на основни компоненти на прополис чрез газов хроматограф, свързан към детектора за маса Agilent MSD 5973 при йонизация с електронен удар. Основните съединения на прополисната проба бяха идентифицирани и са изброени в таблица 3.

Таблица 2:

Таблица 2. Химичен състав на пчелното млечице, оценен чрез GC-MS.

Таблица 3:

Таблица 3. Химичен състав на прополиса, оценен от GC-MS.

В края на експеримента бяха избрани произволно 42 яйца от всяка група (2 яйца от всяка реплика), за да се определи концентрацията на MDA в жълтъка. Пробите на жълтъка се смесват с 1,15% KCI при съотношение 1:10 (тегло/обем), след което се хомогенизират върху фрагментиран лед. Хомогенатите се центрофугират при 18.000xg (+ 4 ° С) в продължение на 30 минути, за да се определят концентрациите на MDA. Концентрацията на MDA като маркер за липидно пероксидиране се определя съгласно метода на Placer et al., [20] въз основа на реакцията с тиобарбитурова киселина. Концентрациите на реагента (10%, w/v трихлороцетна киселина и 0.168%, w/v TBA) се смесват в стъклена епруветка. Разтворът се затопля в продължение на 20 минути. Утайката се отстранява чрез центрофугиране при 4.000 g за 10 минути. Образуваният MDA създава розов комплекс с тиобарбитурова киселина и абсорбцията се отчита при 532 nm. Съдържанието на MDA се изразява като nmol/ml.

Всички яйца бяха събрани в края на експеримента и жълтъкът беше оценен на нивата на MDA. Установено е, че нивата на MDA в жълтъка са най-високи в контролната група, пчелно млечице и ронозим в сравнение с пчелен прашец и прополис (p

Фигура 1:

Фигура 1. Ефект на добавките с пчелно млечице, прополис, пчелен прашец и роназим върху нивото на MDA в жълтъка.

Няколко проучвания съобщават за ефектите от хранителните добавки като средство за подобряване на окислителната стабилност на яйцата. В проучване, за да се изследва ефектът от диетата върху липидното окисляване на черупките на яйцата по време на съхранение в хладилник, бяха използвани 4 прясно събрани яйца от всяка подгрупа, общо 16 яйца от всяко диетично лечение. Четири яйца, всяко от различна подгрупа на всяко диетично лечение, бяха директно анализирани за съдържание на MDA в жълтъка, докато останалите бяха съхранявани при + 4 ° C, за да бъдат анализирани в комплекти от 4 яйца при съхранение 30, 45 и 60 дни. Степента на окисление на липидите, измерена чрез образуване на MDA, се различава при лечението, но не се променя с времето на съхранение. Концентрациите на MDA, открити в жълтъците, трябва да се дължат на консумация и последващо отлагане на MDA, вече образуван в диетите, или на in vivo производство и отлагане на MDA от кокошките по време на храносмилането [8].

Степента на липидно окисление обикновено се определя чрез анализ, основан на реакция между 2-тиобарбитурова киселина (TBA) и MDA по време на нагряване при кисело рН. Опитни изследователи предупредиха, че този анализ може да даде подвеждащи резултати поради приноса на други съединения в допълнение към образувания комплекс TBA-MDA и следователно терминът „реагиращи вещества с тиобарбитурова киселина“ (TBARS) често се използва [24]. TBA реактивността може да бъде повлияна от няколко фактора, включително образуването на MDA като артефакт в анализа по време на самия анализ и появата на MDA в различни свързани форми [25]. Спектрофотометричният метод, използван в настоящото изследване, значително подобрява надеждността на измерванията, тъй като приложеният производен спектрален анализ от трети ред на комплекса TBA-MDA елиминира потенциалните смущения от други реактивни съединения, докато процедурата за подготовка на пробата инхибира окисляването на липидите in vitro по време на самият анализ.

Диетичното включване на пчелно млечице и ронозим не повлиява концентрацията на MDA в жълтъка. По същия начин Yalçın et al., [26] установяват, че добавката на дрожди с автолизат не влияе върху концентрацията на MDA в яйцата. Zhang et al., [27] обаче съобщават, че хранителните добавки със S. cerevisiae подобряват окислителната стабилност на месото от бройлери и предполагат, че това се дължи на някои антиоксидантни фактори, присъстващи в S. cerevisiae, изместващи оксидативния профил на мазнини или мастни киселини в месо.

Живите организми са в състояние да се адаптират към оксидативния стрес, като индуцират синтеза на антиоксидантни ензими и ензими за отстраняване/възстановяване на щети [28]. Установено е, че нивата на MDA в жълтъка са значително по-високи в контролната група в сравнение с пчелния прашец и прополис. Ahmad et al., [29] съобщават за намаляване на циркулиращите триглицериди при птиците поради увеличения прием на ненаситени мастни киселини, което може да намали наличността на липиди за образуването на жълтък. Те също така съобщават, че ненаситените мастни киселини могат да повлияят на циркулиращия естрадиол и предполагат, че ненаситените хранителни мастни киселини могат да променят хормоналния метаболизъм на птиците. Galal et al., [30] съобщават, че качеството на яйчената черупка е значително повлияно от добавянето на прополис, докато процентът и дебелината на яйчената черупка са значително увеличени в яйцето, произведено от кокошки, хранени с диета, съдържаща 100 и 150 mg прополис. Tatli Seven [31] съобщава, че при топлинен стрес добавката на прополис значително увеличава дебелината на черупката на яйцата и теглото на черупката на яйцата при кокошките носачки. Това може да се дължи на подобрената усвояемост и абсорбция на калций в резултат на киселинните производни като бензоена, 4-хидрокси-бензоена, които се намират в прополиса.

В настоящото проучване повишаването на нивото на MDA в жълтъка в контролната група може да е доказателство за оксидативен стрес. Резултатите от настоящото проучване показват, че добавките с прополис и пчелен прашец към диетата на пъдпъдъци са се подобрили много повече от тези с добавките с пчелно млечице и ронозим до липидна пероксидация. Това може да се дължи на по-мощното антиоксидантно съдържание на пчелен прашец и прополис от това на пчелното млечице, ронозим и неговите антиимунни свойства. Включването на пчелен прополис и/или цветен прашец в диетата намалява окисляването на липидите и удължава срока на годност на яйцето, в случай на прополис и пчелен прашец с ненаситена мастна киселина, консумирана от слоеве. Това може да се дължи на антимикробната и имуностимулираща активност на продуктите от пчелни пчели.

Прополисът и пчелният прашец, използвани като алтернатива на антиоксидантите, имат положителни ефекти върху липидната пероксидация. Следователно прополисът и пчелният прашец могат да бъдат препоръчани като промотор на яйца в производството на пъдпъдъци. Те могат да се използват за предотвратяване на липидното окисляване. Той отваря перспективни употреби на пчелен прашец и прополис като фуражна добавка за подобряване на производителността на птиците. В обобщение, настоящото проучване предполага, че добавянето на пчелен прашец и прополис към диетата има потенциална защитна активност върху липидната пероксидация. Прополисът и пчелният прашец могат да се използват като добавка в дажбата на домашни птици поради антиоксидантната способност.