Махдие Ануш

1 Катедра по фармакология и токсикология, Фармацевтично училище, Университет по медицински науки Zanjan, Zanjan, Иран

Али Джани

1 Катедра по фармакология и токсикология, Фармацевтично училище, Университет по медицински науки Zanjan, Zanjan, Иран

Муса Сахебхарани

2 Катедра по фармакология, Медицински факултет, Техерански университет по медицински науки, Техеран, Иран

Мохамад Реза Джафари

3 Катедра по физиология и фармакология, Медицински факултет, Университет по медицински науки в Занджан, Занджан, Иран

Резюме

Обективен: В това проучване ефектите на естрадиол валерат и селективен модулатор на естроген рецептор за ралоксифенея; (SERM) за индуцирана от морфин сенсибилизация са изследвани в паметта на мишките, в съответствие със задачата за понижаване на пасивното избягване.

Метод: Мишките са получавали морфин или естрадиол и ралоксифен в продължение на три дни самостоятелно или в комбинация с морфин. След период без лекарство от 5 дни, субектите са получавали физиологичен разтвор или морфин като предтренировъчни лечения, последвани от предварително тестване на физиологичен разтвор. Извличането на паметта беше оценено с помощта на тест за пасивно избягване с понижаване както на тренировъчния, така и на тестовия ден.

Резултати: Резултатите илюстрират, че тридневното приложение на морфин индуцира сенсибилизация чрез подобряване на извличането на паметта (морфин индуцирана сенсибилизация в паметта на мишки). Както тридневното приложение на естрадиол валерат самостоятелно, така и с морфин (5 mg/kg) възстановява паметта. От друга страна, тридневното приложение на ралоксифен няма ефект върху извличането само на паметта, но намалява индуцираната от морфин сенсибилизация в паметта на мишките.

Заключение: Резултатите от проучването показват, че има взаимодействие между модулаторите на естрогенните рецептори и индуцираната от морфин сенсибилизация в паметта на мишките.

Доказано е, че няколко ефекта от острата и хронична експозиция на морфин се изразяват по различен начин въз основа на пола, като антиноцицепция (18), локомоция (19) и развитие на толерантност и зависимост (20). Освен това, според предишни изследвания е доказано, че естрогенът влияе върху обучението и паметта (21), докато неговата ефикасност варира в зависимост от дизайна на изследването на задачите (22), видовете памет (23) и продължителността на хормоналното приложение (24).

Според предишни доклади естрогенът играе значителна роля в индуцирането на остра толерантност към индуцирана от морфин аналгезия (25). Освен това се съобщава, че свързаната с морфин контекстна памет може да бъде намалена от тамоксифен и това увреждане може да бъде забранено от лечение с естрадиол (26). От друга страна, хетеродимеризацията на гръбначния капа- и му-опиоидния рецептор може да бъде модифицирана чрез гръбначен синтез на естроген и едновременно сигнализиране от мембранни естрогенни рецептори и специфична за жената спинална морфинова антиноцицепция (27). Проведени са много проучвания за взаимодействията на естроген и морфин, но няма съобщения за ефектите на естрогена върху сенсибилизацията, предизвикана от морфин при учене на мишки.

Целта на това проучване е да се оценят ефектите на различни дози естрадиол валерат и ралоксифен (селективен модулатор на естрогенните рецептори; SERM) върху индуцираната от морфин сенсибилизация в паметта на мишките.

Материали и методи

В това проучване са използвани мъжки възрастни NMRI мишки (отгледани в отдел за животни, Фармацевтично училище, с лиценз ISO17025) с тегло 20,2–29,4 g. Животните бяха настанени в помещение с колония с контролирана температура/влага (22 ± 3 ° C/45-55% влажност) и бяха поддържани в 12-часов цикъл светлина/тъмнина със свободен достъп до храна и вода, освен по време на експерименти. Експериментите са правени между 10:00 и 15:00. Животните бяха адаптирани към лабораторните условия в продължение на поне 72 часа преди експериментите. Всяка обработена група включваше десет животни. Протоколите са извършени в съответствие с националните насоки за грижи и употреба на животните, които са одобрени от Комитета по етика на института.

Наркотици и химикали:

Морфин сулфатът е закупен от Темад (Иран). Естрадиол валерат, ралоксифен и ултрафилтрирано сусамово масло (като носител за естрадиол) са закупени от Iran Hormone Company. Полиетилен гликол 300 (PEG300) е закупен от Merck Schuchardt OHG (Hohenbrunn, Германия).

Морфин сулфатът се разтваря в нормален физиологичен разтвор (0,9%) и естрадиол валерат, емулгиран в сусамово масло и нормален физиологичен разтвор (0,9%). PEG300 се използва като носител за ралоксифен.

Апарат за пасивно избягване

Апаратът за пасивно избягване включва дървена кутия (30 × 30 × 40 cm височина), подът на която е направен от 29 успоредни пръти от неръждаема стомана (0,3 cm в диаметър, на разстояние 1 cm една от друга). В центъра на пода на решетката е поставена дървена платформа (4 × 4 × 4 см). Прекъснати електрически удари (1 Hz, 0,5 сек, 50 V DC) бяха прехвърлени към пода на мрежата от изолиран стимулатор (Panlab LE12106, Испания). С прилагането на този апарат беше изпълнена задача за пасивно избягване за еднократно изпробване. Всяка мишка беше внимателно поставена върху дървената платформа. Когато мишката се оттегли от платформата и постави всичките си четири лапи на пода на решетката, тогава тя получи токов удар за 15 секунди. За установяване на теста за задържане, всяка мишка беше поставена отново на платформата в рамките на 24 часа след тренировка и латентността на понижаването беше записана с хронометър. За записване на времето беше определено време за прекъсване от 300 сек.

Експеримент 1: Този експеримент изследва индуцирана от морфин сенсибилизация в паметта за пасивно избягване. Животните в една контролна група са получавали 10 ml/kg нормален физиологичен разтвор подкожно (S.C.) както в предтренировъчни, така и в предтестови приложения. Другата контролна група получава 5 mg/kg (S.C) морфин като предварително обучение и физиологичен разтвор като лечение преди теста. Три други групи са получавали 5, 10 и 20 mg/kg морфин интраперитонеално (I.P) в продължение на три дни; след пет дни период без лекарство, те получават 5 mg/kg морфин като предварително обучение, последвано от предварително тестово приложение на физиологичен разтвор (10 ml/kg, I.P).

Експеримент 2: Този експеримент оценява ролята на естрадиол валерата върху индуцираната от морфин сенсибилизация при ученето. В тези експерименти всички животински групи са получавали морфин (5 mg/kg, S.C) като предварително обучение и физиологичен разтвор (10 ml/kg) като лечение преди теста. Един набор от животински групи са получавали 0,45, 0,9 и 1,8 mg/kg естрадиол валерат интраперитонеално (I.P) с едновременно приложение на физиологичен разтвор (10 ml/kg, I.P) в продължение на три дни. Другият набор от групи са получавали 0,45, 0,9 и 1,8 mg/kg естрадиол валерат (I.P) с едновременно приложение на морфин (5 mg/kg, S.C) в продължение на три дни.

Експеримент 3: Този експеримент оценява ролята на ралоксифен върху индуцираната от морфин сенсибилизация при ученето. В този експеримент животински групи са получавали 10 ml/kg физиологичен разтвор или 5 mg/kg морфин (S.C) като предварително обучение и физиологичен разтвор (10 mg/kg) като лечение преди теста. Една група животински групи са получавали 5, 10 и 20 mg/kg ралоксифен (I.P), последвано от физиологичен разтвор (10 ml/kg, I.P) в продължение на три дни. Другият набор е получавал 5, 10 и 20 mg/kg ралоксифен (I.P) и морфин (5 mg/kg, S.C) в продължение на три дни.

ефекти

Ефектът от (3 дни различни дози морфин + физиологичен разтвор преди тренировка или морфин

+ предварителна проба за физиологичен разтвор) за намаляващите латентности в сравнение със съответните контролни групи. Всяка стойност представлява медиана и квартил на 10 животни.

Ограничение

Настоящото проучване е направено със SERM (ралоксифен), който пълен антагонист на естрогенните рецептори като фулвестрант е по-добър, отколкото вместо.

Заключение

Резултатите от настоящото проучване разкриха взаимодействие между модулаторите на естрогенните рецептори и индуцираната от морфин сенсибилизация при учене на мишки.