Информация за статия

Dipak K. Giri, д-р DVM, доктор на науките, интегрирани лабораторни системи, Inc, пощенска кутия 13501, Изследователски триъгълник парк, NC 27709 Имейл: [имейл защитен]

бъбречна

Резюме

Микотичният менингоенцефалит при кучета може да се прояви като основно заболяване на централната нервна система или като част от разпространена инфекция. Гъби, принадлежащи към рода Биполарис са сапрофитни растителни патогени и могат да причинят заболяване при хората. Авторите съобщават за случай на Биполарис инфекция при куче с грануломатозен менингоенцефалит, нефрит и васкулит. Клиничните и хистологични характеристики наподобяват тези на по-често срещаната аспергилоза, като по този начин се потвърждава чрез молекулярни методи. Идентифицирана е полимеразна верижна реакция и анализ на последователността Биполарис от мозъчната лезия, което показва участието му в заболяването. Доколкото знаят авторите, това е първият докладван случай на менингоенцефалит, причинен от тази гъба при домашно животно.

При кучета редица гъбични агенти причиняват инфекция на централната нервна система (ЦНС) или като първично вътречерепно заболяване, или като компонент на дисеминирана инфекция. Гъби като Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Aspergillus sp, Фузариум, и Cladophialophora bantiana е известно, че причиняват инфекция на ЦНС. 1,3,6,9,12 В този доклад ние описваме разпространена микоза с участие на ЦНС при куче, причинена от Биполарис sp (известен преди като Drechslera spicifera 10).

Клинична история

8-годишна стерилизирана женска кръстоска лабрадор ретривър беше представена като спешна ситуация в Ветеринарната медицинска болница за обучение в Тексаския университет A&M. Кучето е имало анамнеза за прогресивна загуба на тегло, липса на апетит, полиурия и полидипсия в продължение на 2 месеца, както и скорошно начало на повръщане, дясно наклоняване на главата, нистагъм и загуба на усещане от дясната страна на лицето. Ненормалните находки при неврологично изследване включват постурални дефицити, падане от двете страни и променена ментация. Диагнозата на централната вестибуларна болест се основава на клинични признаци и невроанатомична локализация. Животното е евтаназирано поради лошата прогноза.

Некропсия и хистологични находки

При аутопсията мозъкът беше напълно нормален, без видими огнища на обезцветяване или малация. Десният бъбречен таз е умерено разширен и съдържа оскъден мек тен до жълт материал. И двата бъбрека са имали няколко малки сферични или неправилни кавитации (до 8 mm в диаметър) в кортикомедуларната връзка. Представителните тъкани бяха фиксирани в 10% неутрален буфериран формалин, рутинно обработени, вградени в парафинов восък и разделени на 4 до 6 μm за хистологична и хистохимична оценка.

Хистологичните промени се разпространяват през мозъка, моста, продълговатия мозък и околните лептоменинге. Мултифокална бледност и кавитация са в мозъчната кора (Фиг. 1). Мултифокално паренхимът на мозъчната кора и продълговатия мозък е закрит от дискретни, некаказиращи, некапсулирани, фокално коалесциращи грануломи, вариращи от едва 50 μm до няколко милиметра в диаметър и съставени от макрофаги, лимфоцити, по-малко плазмени клетки и редки многоядрени гиганти клетки (фиг. 2). Пространствата разделяха тези грануломи от съседния невропил. Лептоменингите бяха разширени до 10 пъти от подобни възпалителни клетки и оток. Няколко менингеални кръвоносни съда бяха разширени, запушени от възпалителните клетки, фибрин, клетъчни остатъци и отоци и те бяха нарушили стените (фиг. 3). Периваскуларното пространство беше разширено от фиброза. Няколко многоядрени клетки са имали интрацитоплазмени гъбични организми (фиг. 4). Метенаминовото сребро на Grocott подчертава многобройни неправилно септирани и недихотомично разклоняващи се гъбични хифи с широки 3- до 6 μm непаралелни стени в мозъчните лезии (фиг. 5). Бъбречните секции имаха подобни грануломи, с интралезионни гъбични хифи в кората, медулата и таза.

Фигура 1. Церебрум; куче. Фокално обширно разреждане в невропила е прогресирало до кавитация (върхове на стрелки) в мозъчното сиво вещество. ТОЙ.

Фигура 2. Церебрум; куче. Множество дискретни ангиоцентрични грануломи фокално заместват мозъчния паренхим. ТОЙ.

Фигура 3. Церебрум; куче. Лептоменингите се разширяват с оток и множество левкоцити. Менингеален съд има инфилтрация на стенописи от множество макрофаги, лимфоцити, плазмени клетки и редки многоядрени гигантски клетки (стрелка). ТОЙ.

Фигура 4. Церебрум; куче. По-голямо увеличение на съдовата стена на фиг. 3. Многобройни възпалителни клетки включват многоядрена гигантска клетка с цитоплазмени гъбични хифи (върха на стрелката). ТОЙ.

Фигура 5. Церебрум; куче. Гъбичните хифи (върховете на стрелките) са във възпалителния ексудат в съдовата стена. Метенаминовото сребро на Grocott.

Фигура 6. Електрофореза с агарозен гел на полимеразна верижна реакция - усилена гъбична рДНК: ITS3 и ITS4. Пътека 1, 1 Kb ДНК стълба (числата вляво са в килобази); път 2, проба за изпитване; лента 3, положителен контрол (Candida albicans); лента 4, бъбрек от куче, съвпадащо с възрастта, без анамнеза за гъбична инфекция; лента 5, без контрол на шаблон.

Молекулярна диагностика

Дискусия

Централната вестибуларна болест е резултат от дисфункция на вестибуларните ядра в мозъчния ствол или от заболяване, засягащо опашните церебеларни дръжки или флокулонодуларния лоб на малкия мозък. 13 Общите заболявания, свързани с централната вестибуларна болест при кучета, включват кучешка чума, токсоплазмоза, неоспоридиоза, криптококоза, аспергилоза, грануломатозен менингоенцефалит, лаймска болест, скалиста треска на скалистите планини и ерлихиоза, както и новообразувания. Органофосфорната токсичност, чернодробната енцефалопатия и дефицитът на тиамин са по-редки причини. Диагнозата на антиморте обикновено се основава на анализ на цереброспинална течност, титър на антитела, култура и образна диагностика, като магнитно резонансно изображение. В този случай не са извършени диагностични изследвания, включително образно изследване, анализ на цереброспиналната течност и гъбична култура.

Патогенезата на микотичния енцефалит често е неясна. При хората системните гъбични заболявания са по-чести при имунокомпрометирани индивиди. Гъбичните патогени могат да проникнат в организма по дихателен, стомашно-чревен и кожен път. Наличието на хифи в съдовете предполага хематогенно разпространение при това куче. В кръвоносните съдове на лептоменингите и бъбреците са наблюдавани множество хистиоцитни интрацитоплазмени и извънклетъчни гъби. Предвид едномесечните клинични признаци на загуба на тегло и полиурия/полидипсия и внезапната поява на заболяване на ЦНС, предполагаме, че енцефалитът е вторичен спрямо първичното бъбречно заболяване. Няма анамнеза за приложение на стероиди при този пациент или други доказателства за имуносупресия.

Родът Биполарис съдържа приблизително 47 вида повсеместни, предимно растителни патогени и най-често се свързва с треви, растителен материал, разлагаща се храна и почва. Три вида -B spicifera, B australiensis, и B hawaiiensis са демациални гъби и могат да причинят феохифомикоза. Наскоро, Биполарис Съобщава се, че sp причинява човешки заболявания, включително менингит, особено при имунокомпрометирани пациенти. Доклади на Биполарис инфекциите при животните са оскъдни. 5,10 Едновременна системна микоза с B spicifera и Torulopsis glabrata включващо кожата, бъбреците, перикарда и сърцето при куче е съобщено без участие на ЦНС. 15

Докладите за церебрална феохифомикоза, причинени от демациални гъби при кучето, са необичайни. Кладоспориум кладоспориоиди е изолиран от случай на грануломатозен енцефалит и нефрит при немска овчарка. 11 Случаят, докладван тук, описва участието на Биполарис при куче с болест на ЦНС. Биполарис е демациална гъба; в тъканните участъци обаче гъбичните хифи са били слабо пигментирани за разлика от интензивно пигментираните гъби, често наблюдавани при феохифомикоза. Нивото на пигментация във фаохифомицесите зависи от променливи като скорост на растеж, жизнеспособност, възраст и наличност на хранителните вещества. Въз основа на съдържанието на пигмент, гъбичките в този случай наподобяват недематични Hyphomyces, като Aspergillus. Имунохистохимията със специфично за рода антитяло обаче не успя да покаже Aspergillus в мозъка или бъбреците (данните не са показани), като по този начин намалява индекса на подозрение за неговото участие в този случай.

Най-надеждният, бърз и чувствителен метод за идентифициране на гъбичен агент е PCR. Той елиминира недостатъците на културата (т.е. по-дълго време за растеж и допълнителни лабораторни тестове за идентификация) и предизвикателствата на морфологичната идентификация. Изолираната ДНК от мозъка и бъбреците имаше 100% хомология с Биполарис, като по този начин потвърждава участието си в болестта.

Хистологично микотичната инфекция в ЦНС обикновено се свързва с грануломатозно възпаление със засягане на менингите и съдовете, 3,9,11 и хистологичното разпределение и естеството на мозъчните лезии в настоящия случай са съвместими с това. Разпръснатите кавитации със загуба на невропил предполагат исхемия от оклузивен васкулит. Предвид ниската специфичност на хистологичните характеристики, окончателното идентифициране на гъбичния патоген често е трудно и налага молекулярни стратегии за потвърждение.

В обобщение, случай на гъбичен менингоенцефалит при куче с дисеминирана микоза е свързан с инфекция с Биполарис sp. Клиничните признаци предполагат централна вестибуларна болест. Доколкото ни е известно, това е първият доклад за клинично заболяване, причинено от Биполарис sp с участие на ЦНС при домашно животно. Този организъм трябва да бъде включен в диференциалната диагноза за микотичен менингоенцефалит.

Благодарности

С благодарност се признава финансовата подкрепа за д-р Sims от GlaxoSmithKline за обучение за резидентство чрез коалиция ACVP/STP. Благодарим на д-р Салваторе Фраска-младши за съвети относно експерименталния дизайн и г-жа Сара Джоунс и нейната група за подготовка и оцветяване на тъканни секции.

Авторите декларират, че нямат конфликт на интереси по отношение на тяхното авторство или публикуването на тази статия.

Авторите декларират, че не са получили финансова подкрепа за своите изследвания и/или авторство на тази статия.