Морфологични изменения на околоушната жлеза на плъхове, поддържани на течна диета

Soraya Coelho Leal I; Орландо Айртон де Толедо II; Ана Кристина Барето Безера II

I Област на морфологията, Медицински факултет, UnB, Бразилия, DF, Бразилия
II катедра по дентална медицина, Факултет по здравни науки, UnB, Бразилия, Бразилия

Целта на това проучване е да се анализират морфологичните промени, настъпили в паротидните жлези на плъхове, поддържани на течна диета в сравнение с твърда диета. Тридесет и шест животни бяха разделени на случаен принцип в две групи. Контролната група е получила солидна диета, а експерименталната група е получила течна диета. Животните бяха убити след 8, 15 и 30 дни. Жлезите се подготвят за включване в парафин и се анализират със светлинен микроскоп. Резултатите показват статистически значимо намаляване на теглото на околоушната жлеза на животните от експерименталната група в сравнение с контролната група на 15 и 30 дни. Показаната най-силна морфологична промяна е наличието на вакуоли на цитоплазмата върху паротидните жлези на животните, поддържани на течна диета. Специфични техники за оцветяване на гликопротеини и мукополизакариди не могат да идентифицират веществата във вакуолите, наблюдавани при експерименталните животни. Ние заключаваме, че течната диета е причинила атрофия на околоушната жлеза след 15 и 30 дни.

Ключови думи: паротидна жлеза, слюнчена жлеза, диета, светлинна микроскопия.

Esse trabalho teve por objetivo analisar as alterações morfológicas das glândulas parótidas de ratos submetidos a uma dieta líquida. Trinta e seis animais foram divideidos aleatoriamente em dois grupos. O grupo controle recebeu dieta sólida, e o grupo eksperimental recebeu dieta líquida. Os animais foram жертвоприношения 8, 15 e 30 dias após o início da eksperimentação. Като glândulas foram incluídas em parafina e analisadas no microscópio de luz. Os resultados mostraram uma redução estatisticamente signifate no peso das glândulas parótidas dos animais do grupo eksperimentalno quando comparado aos dos animais do grupo control no periodos de 15 e 30 dias. A alteração morfológica има важно значение за доказателство за вакуол без цитоплазма das glândulas parótidas dos animais alimentados com dieta líquida. Os vacúolos citoplasmáticos reagiram negativamente às técnicas de coloração específicas para glicoproteínas e mucopolissacarídeos (PAS e Alcian blue). Concluiu-se que a dieta líquida causou atrofia das glândulas parótidas nos períodos Experimentais de 15 e 30 dias.

ВЪВЕДЕНИЕ

Секретите на слюнчените жлези са богати на течности, йони и протеини, важни за здравето на устната кухина и целостта на зъбите. Скоростта на потока е силно защитна срещу кариес и лица с намалено отделяне на слюнка трябва да бъдат идентифицирани, за да модифицират програмите за лечение и профилактика по начини, които намаляват риска от кариес (1). Пациентите, показващи хипо-слюнчен поток или ксеростомия, обикновено показват висока кариесна активност, ако се поддържат други епидемиологични променливи (2,3).

Слюнката оказва голямо влияние върху инициирането, узряването на плаката и метаболизма. По време на процеса на кариес слюнката се намесва по няколко начина. Когато се стимулира, той може да увеличи количеството на защитни йони като калций, фосфат и флуорид, които са свързани с процеса на деминерализация и реминерализация на емайла. Слюнката също произвежда антимикробни вещества като имуноглобулини, лизозим, лактоферин и слюнна пероксидаза, които могат да имат незабавен ефект върху оралните бактерии, пречещи на техния метаболизъм, произвеждайки киселина и активирайки размножаването или ги убивайки директно (4-6). С други думи, ролята на слюнката в поддържането на целостта на зъбите е отражение на механичното почистване и клирънса на въглехидратите, пост-еруптивното съзряване на емайла, регулирането на йонната среда в течността на плаката, за да осигури реминерализиращ потенциал и ограничаване на дифузията на киселина.

Тези защитни свойства са свързани със слюнчения поток. Следователно всяко изменение на целостта и дейността на слюнчените жлези може да промени потока и състава на слюнката. В диетата трябва да се вземат предвид много фактори като нейната текстура, вкус и консистенция (7-9). Според Едгар и Дженкинс (10), прилагането на диети, изискващи намалено или повишено дъвчене на плъхове, води съответно до атрофия или хипертрофия на слюнчените им жлези. Джонсън и Срийбни (11) отбелязват, че когато плъховете се хранят с твърда храна, теглото, ензимното съдържание и синтеза на протеини в околоушните жлези се увеличават. От друга страна, Scott et al. (12) анализира промените, причинени от течна диета на паротидни жлези на плъхове и заключи, че теглото на жлезите е намалено приблизително с 35% при плъхове на течна диета в сравнение с контролните животни.

В литературата, проведена при хора, има ограничени проучвания. Ефектите от храненето и диетата трябва да се оценяват по отношение на секрецията на потока и състава на слюнката. Независимо от това, откритията при хора са значително подобни на резултатите от проучвания върху животни. Следователно знанията от животинския модел са полезни за разбирането на промените в клетъчните жлези, както и тяхното влияние върху състава на слюнката (13).

Целта на това проучване е да се анализират морфологичните изменения, настъпили в паротидната жлеза на плъховете, поддържани на течна диета.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Тридесет и шест 90-дневни мъжки плъхове Wistar със средно тегло 210 g (Лабораторен център за животни към Университета в Бразилия) бяха разделени на случаен принцип в две групи. Контролната група е хранена с твърда диета (Purina) и вода ad libitum. Животните от експерименталната група бяха хранени с течна диета и вода ad libitum. Течната диета се приготвя ежедневно чрез смесване на една част твърда чау (20 g) и 5 ​​части дестилирана вода (100 ml). Сместа се смесва в продължение на 3 минути и се предлага на животните (14).

След 8, 15 и 30 дни контролните и експерименталните плъхове се претеглят и убиват чрез предозиране с етер. Паротидната жлеза от всяка страна беше внимателно дисектирана непокътната и претеглена. За хистологични изследвания жлезите се поставят в 10% буфериран формалин и се обработват по конвенционални методи за вграждане в парафин. Бяха получени срезове от шест микрометра и оцветени с хематоксилин и еозин (H&E), периодична киселина-Schiff (PAS) и Alcian blue за оценка на светлинната микроскопия. Статистическата значимост е оценена от студента т-тест.

Животните от двете групи натрупаха тегло в същия диапазон и изглеждаха здрави по време на експерименталния период.

Теглото на околоушните жлези за трите експериментални периода е отчетено в Таблица 1. Наблюдава се намаляване на теглото на жлезите на експерименталните животни в сравнение с контролните животни на 8, 15 и 30 дни. Въпреки това тази разлика не е била статистически значима за периода от 8 дни.

изменения

По време на експерименталните периоди контролната група имаше структура, обикновено описана като нормална за околоушната жлеза. Секции, оцветени с H&E, разкриват серозни ацини с пирамидални клетки, заобикалящи малък централен лумен със сферично, базово ядро ​​(Фигура 1).

Хистологичният вид на околоушните жлези от плъхове на течна диета е много подобен на околоушните жлези от контролната група. Паренхимът на жлезата, междуклетъчните пространства и ядрото не са претърпели съществени промени. Въпреки това, серозният ацинус показа слаба атрофия и някои ацинарни клетки бяха дегранулирани. Слюнчените канали се считат за нормални. Вакуолите в клетъчната цитоплазма на паротидните жлези от експерименталната група могат да се видят през всички периоди на експериментиране. Тези вакуоли са по-чести на 15 и 30 дни (Фигури 2-4). PAS се използва за идентифициране на гликопротеини и Alcian blue за идентифициране на мукополизакариди във вакуолите; съдържанието на вакуолите обаче реагира негативно и за двете техники (Фигури 5 и 6).

Резултатите показват намаляване на теглото на околоушната жлеза, когато плъховете са били хранени с течна диета през всички периоди от време; тази разлика обаче е била статистически значима само на 15 и 30 дни. Въпреки че на 8-ия ден се наблюдава намаляване на теглото на околоушната жлеза в третираната група, намаляването не е статистически значимо. Това може да се обясни със стойностите на стандартното отклонение, при които може да се види по-висок SD (± 130,16) за контролната група, причинена от една жлеза, която е показала неочаквано увеличение на теглото си (Таблица 1).

Атрофията на животинските жлези, хранени с течна диета, е наблюдавана в много различни проучвания (15-19). В литературата съществува консенсус относно намаляването на размера и теглото на слюнчените жлези, когато функцията е намалена чрез премахване на необходимостта от дъвчене.

Най-общо казано, морфологични промени не са наблюдавани, когато околоушните жлези от третираната група са изследвани микроскопски. Единствената важна промяна е свързана с наличието на вакуоли в цитоплазмата на ацинарните клетки, по-голяма на 15 и 30 дни (Таблица 1).

Hand и Ho (17) съобщават за наличието на липиди в атрофичните ацинарни клетки. Тази хипотеза обаче не може да бъде потвърдена в това проучване, тъй като методът, използван за фиксиране на тъканта, не е подходящ за изследвания на липидите.

Други проучвания съобщават за хистологични промени в слюнчените жлези при плъхове, хранени с течна диета, с намаляване на размера на ацинарните и каналчевите клетки (16,18,19). Резултатите от настоящия експеримент не потвърждават тези промени, въпреки че ацинарните клетки очевидно показват лека атрофия в сравнение с контролната група. Независимо от това, тези открития не могат да се считат за убедителни, тъй като не е проведено морфометрично проучване.

Може да се заключи, че теглото на околоушната жлеза на плъхове, поддържани на течна диета, е по-малко от теглото на плъхове, хранени с твърда чау. Тази разлика е била статистически значима на 15 и 30 дни. Цитоплазмата на ацинарните клетки от третираната група показва изразена вакуолизация, по-голяма на 15 и 30 дни, и специфични техники за оцветяване на гликопротеини и мукополизасариди не успяха да идентифицират тези органични съединения във вакуолите.

Въпреки че настоящото изследване не оценява връзката на слюнката и кариеса, значението на слюнката в процеса на кариеса е добре известно (5). Muñiz и съавтори (20) съобщават, че храни, които изискват значително дъвчене, могат да предизвикат по-висока скорост на слюнчен поток чрез локален рефлекс. По този начин повишената скорост на слюнчен поток, увеличаването на слюнката и съответно на pH на зъбната плака и компонентите на слюнката могат да бъдат основни фактори за предотвратяване на кариес.

По този начин е много важно да се разберат възможните механизми, които могат да модифицират функцията и активността на слюнчените жлези. Има някои въпроси, на които не е отговорено, и някои асоциации, които трябва да се направят. Могат ли децата, които се поддържат на течна диета за дълги периоди, да страдат от някакви промени в слюнчената си жлеза? Ако е така, може ли тази промяна да повлияе на скоростта и състава на слюнката?

1. Леоне CW, Опенхайм FG. Физически и химични аспекти на слюнката като показатели за риск от зъбен кариес при хората. J Dent Edu 2001; 65: 1054-1062. [Връзки]

2. Guggenheimer J, Moore PA. Ксеростомия: етиология, разпознаване и лечение. J Am. Dent Assoc 2003; 134: 61-69. [Връзки]

3. Lingstrom P, Moyninhan P. Хранене, слюнка и здраве на устната кухина. Хранене 2003; 19: 567-569. [Връзки]

4. Birkhed D, Heintze V. Скорост на секреция на слюнка, буферен капацитет и pH. В: Човешка слюнка: Клинична химия и микробиология. Tenuovo JO. Изд. Кн. I. Boca Raton: CRC Press; 1989. стр. 26. [Връзки]

5. Lagerlof F, Oliveby A. Кариес-защитни фактори в слюнката. Adv Dent Res 1994; 8: 229-238. [Връзки]

6. Amerongen NAV, Veerman ECI. Слюнка - защитникът на устната кухина. Орални болести 2002; 8: 12-22. [Връзки]

7. Джонсън DA. Efeitos da dieta e da nutrição sobre a composição da слюнка. В: Cariologia para a Década de 90. Bowen WH, Tabak LA. Изд. Trad. Oppido T, Сао Пауло: Сантос; 1995. стр. 367-381. [Връзки]

8. Lenander-Lumikari M, Loimaranta V. Слюнка и зъбен кариес. Adv Dent Res 2000; 14: 40-47. [Връзки]

9. Sweeny EA. Слюнчен поток и състав по отношение на зъбния кариес. Методи и проблеми при изучаването на тази връзка. В: Сборник и кариес на зъбите. Kleinberg I, Ellison SA, Mandel ID. Изд. Ню Йорк: Извличане на информация; 1979. стр. 183. [Връзки]

10. Едгар У.М., Дженкинс Г.Н. Може ли слюнчената функция при човека да се засили чрез повишено дъвчене? J Dent Res 1981; 60 (B): 1172. [Връзки]

11. Джонсън DA, Sreebny LM. Ефект на повишено дъвчене върху отделителния процес на паротидната жлеза на плъх. Archs Oral Biol 1973; 18: 1555-1558. [Връзки]

12. Scott J, Berry MR, Gunn DL, Woods K. Ефектите на течната диета върху първоначалната и продължителна, стимулирана паротидна секреция на слюнката на паротидната структура на плъха. Archs Oral Biol 1991; 36: 855-857. [Връзки]

13. Turner RJ, Sugiya H. Слюнчени жлези и слюнка. Устна болест 2002; 8: 3-11. [Връзки]

14. Джонсън DA. Ефект на течната диета върху протеиновия състав на слюнката на паротидната плъх. J Nutr 1982; 112: 175-181. [Връзки]

15. Зала HD, Scheneyr CA. Атрофия на слюнчените жлези при плъхове, предизвикана от течна диета. Proc Soc Exp Biol Med 1964; 117: 789-793. [Връзки]

16. Зала HD, Scheneyr CA. Индуцирани от Metrecal промени в човешката слюнка. Proc Soc Exp Biol Med 1967; 124: 532-536. [Връзки]

17. Hand AR, Ho B. Промени, предизвикани от течна диета на ацинарни клетки на паротидни плъхове, изследвани чрез електронна микроскопия и ензимна цитохимия. Archs Oral Biol 1981; 26: 369-380. [Връзки]

18. Sreebny LM, Johnson DA. Ефект на консистенцията на храната и намаления прием на храна при паротидни плъхове и панкреас. Am J Physiol 1971; 215: 3879-3884. [Връзки]

19. Джонсън DA, Sreebny LM. Ефект на консистенция на храна и глад върху дневния цикъл на паротидната жлеза на плъх. Archs Oral Biol 1971; 16: 177-185. [Връзки]

20. Muñiz BR, Maresca BM, Tumilasci OR, Perec J. Ефекти от експериментална диета върху рН на паротидната слюнка и зъбната плака при институционализирани деца. Archs Oral Biol 1983; 28: 575-581. [Връзки]

Кореспонденция на
Дра. Soraya Coelho Leal
Área de Morfologia, Faculdade de Medicina, Universidade de Brasília, Campus Universitário
Аса Норте
Бразилия, DF, Бразилия
Тел: + 55-61-307-2256
Имейл: [email protected]

Приет на 5 август 2002 г.

Цялото съдържание на това списание, с изключение на случаите, когато е отбелязано друго, е лицензирано под лиценз Creative Commons Attribution