Ефекти на LBE и RA върху AMPK сигнализиране в HepG2 клетки без PA. Активиране на фосфорилиране на AMPK и ацетил-КоА карбоксилаза (ACC) чрез (A) LBE (50 или 100 μg/ml) и (B) RA (20 или 40 μM) и (C) 100 μg/ml LBE за 0,5–3 h и (D) 40 μM RA за 0,5–3 h. Активиране на чернодробна киназа B1 (LKB1) и Ca 2+/калмодулин-зависима протеин киназа II (CaMKII) фосфорилиране чрез (E) LBE и (F) RA. С PA, (G) активиране на AMPK и ACC фосфорилиране и (H) активиране на LKB1 и CaMK2 фосфорилиране чрез LBE (50 или 100 μg/mL). β-актинът се използва като вътрешен контрол за уестърн блотинг.

Ефект на LBE и RA върху увреждане на черния дроб при мишки с db/db, хранени с диети с метионин и холин (MCD). (А) Експериментален дизайн на проучване върху неалкохолен стеатохепатит (NASH) върху животни. (B) Серумни нива на аланин трансаминаза (ALT) и (C) аспартат трансаминаза (AST). (D) H&E оцветяване на представителни чернодробни секции (стрелките показват възпалителни клетки) (увеличение: 50 ×; лента на скалата: 200 μm). (E) Представителни изображения на чернодробни разрези, оцветени с масло в червено (50 ×; лента с мащаб: 100 μm). (F) Съдържанието на TG в черния дроб. (G) Отлагане на колаген, както е показано чрез оцветяване в Сириус Червено (50 ×; лента от скала: 200 μm). (З) Съдържанието на хидроксипролин в чернодробни секции. (I) нива на експресия на иРНК на свързани с фиброза гени, нормализирани до тези на β-актина. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). # p ## p ### p p p n = 5–6 на група).

Ефекти на LBE и RA върху експресията на гени и протеини, участващи в регулацията на мастните киселини в MCD, хранени с диета db/db мишки. Протеинови нива на (A) SREBP-1c и FAS и (B) PPARα и CPT-1L. Денситометричният анализ на Western blot на (C) SREBP-1c и FAS и (D) PPARα и CPT-1L, нормализиран до тези на нивата на глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (GAPDH) на гените, кодиращи (E) SREBP-1c и FAS, и (F) PPARα и CPT-1L. β-актинът се използва като вътрешен контрол за qPCR анализ. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). # p ## p ### p p p n = 5–6 на група).

Ефекти на LBE и RA върху експресията на гени, регулиращи оксидативния стрес, в мишки с db/db, хранени с диета с MCD. (A) Чернодробен протеин, (B) денситометричният анализ на WB и (C) експресия на иРНК на NRF2 и SOD1. (D) Чернодробна иРНК експресия на макрофаги възпалителен протеин-1 алфа (MIP-1ɑ) и междуклетъчна адхезионна молекула 1 (ICAM-1). (E) Фосфорилиране на AMPK и (F) денситометричният анализ на WB при MCD диети, хранени с диета, третирани с LBE или RA. GAPDH е като вътрешен контрол за анализ на WB и β-актин се използва за експресия на иРНК. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). * p # p ## p ### p p n = 5–6 на група).

Резюме

лимонов

Ефекти на LBE и RA върху AMPK сигнализиране в HepG2 клетки без PA. Активиране на фосфорилиране на AMPK и ацетил-КоА карбоксилаза (ACC) чрез (A) LBE (50 или 100 μg/ml) и (B) RA (20 или 40 μM) и (C) 100 μg/ml LBE за 0,5–3 h и (D) 40 μM RA за 0,5–3 h. Активиране на чернодробна киназа B1 (LKB1) и Ca 2+/калмодулин-зависима протеин киназа II (CaMKII) фосфорилиране чрез (E) LBE и (F) RA. С PA, (G) активиране на AMPK и ACC фосфорилиране и (H) активиране на LKB1 и CaMK2 фосфорилиране чрез LBE (50 или 100 μg/mL). β-актинът се използва като вътрешен контрол за уестърн блотинг.

Ефект на LBE и RA върху увреждане на черния дроб при мишки с db/db, хранени с диети с метионин и холин (MCD). (А) Експериментален дизайн на проучване върху неалкохолен стеатохепатит (NASH) върху животни. (B) Серумни нива на аланин трансаминаза (ALT) и (C) аспартат трансаминаза (AST). (D) H&E оцветяване на представителни чернодробни секции (стрелките показват възпалителни клетки) (увеличение: 50 ×; лента на скалата: 200 μm). (E) Представителни изображения на чернодробни разрези с оцветени в червено масло (50 ×; лента с мащаб: 100 μm). (F) Съдържанието на TG в черния дроб. (G) Отлагане на колаген, както е показано чрез оцветяване в Сириус Червено (50 ×; лента от скала: 200 μm). (З) Съдържанието на хидроксипролин в чернодробни секции. (I) нива на експресия на иРНК на свързани с фиброза гени, нормализирани до тези на β-актина. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). # p ## p ### p p p n = 5–6 на група).

Ефекти на LBE и RA върху експресията на гени и протеини, участващи в регулацията на мастните киселини в MCD, хранени с диета db/db мишки. Протеинови нива на (A) SREBP-1c и FAS и (B) PPARα и CPT-1L. Денситометричният анализ на Western blot на (C) SREBP-1c и FAS и (D) PPARα и CPT-1L, нормализиран до тези на нивата на глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (GAPDH) на гените, кодиращи (E) SREBP-1c и FAS, и (F) PPARα и CPT-1L. β-актинът се използва като вътрешен контрол за qPCR анализ. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). # p ## p ### p p p n = 5–6 на група).

Ефекти на LBE и RA върху експресията на гени, регулиращи оксидативния стрес, в мишки с db/db, хранени с диета с MCD. (A) Чернодробен протеин, (B) денситометричният анализ на WB и (C) експресия на иРНК на NRF2 и SOD1. (D) Чернодробна иРНК експресия на макрофаги възпалителен протеин-1 алфа (MIP-1ɑ) и междуклетъчна адхезионна молекула 1 (ICAM-1). (E) Фосфорилиране на AMPK и (F) денситометричният анализ на WB при MCD, хранени с диета, третирани с LBE или RA. GAPDH е като вътрешен контрол за анализ на WB и β-актин се използва за експресия на иРНК. Резултатите се изразяват като средната стойност ± SD (% контрол). * p # p ## p ### p p n = 5–6 на група).