Отделение по биохимия, Университет Мемориал, Сейнт Джонс, Нидерландия, Канада

мастни

Отделение по биохимия и молекулярна биология и Център за сърдечно-съдови изследвания, Университет Сейнт Луис, Сейнт Луис, Мисури, Съединени американски щати

Отделение по биохимия и молекулярна биология и Център за сърдечно-съдови изследвания, Университет Сейнт Луис, Сейнт Луис, Мисури, Съединени американски щати

Отделение по биохимия, Университет Мемориал, Сейнт Джонс, Нидерландия, Канада

Отделение по биохимия, Университет Мемориал, Сейнт Джонс, Нидерландия, Канада

  • Кайоде А. Балогун,
  • Каролин Дж. Албърт,
  • Дейвид А. Форд,
  • Робърт Дж. Браун,
  • Sukhinder K. Cheema

Фигури

Резюме

Заден план

Омега (п) -3 полиненаситените мастни киселини (PUFA) се превръщат в биоактивни липидни компоненти, които са важни медиатори в метаболитните и физиологичните пътища; обаче кои биоактивни съединения са метаболитно активни и механизмите им на действие все още не са ясни. Изследвахме с помощта на липидомични техники, ефектите от диети с високо съдържание на n-3 PUFA върху състава на мастните киселини на различни биоактивни липиди в плазмата и черния дроб.

Методология и основни констатации

Таблица 1. Състав на мастните киселини на експерименталните диети.

Липидомичен анализ

Екстракция на липиди, стандарти и разтворители.

Електроспрей йонизационно-масова спектрометрия (ESI-MS).

Пробите бяха анализирани с използване на ESI-MS с директна инфузия в режим на положителен или отрицателен йон, използвайки система Thermo Fisher TSQ Quantum Ultra със софтуер за събиране на данни XCalibur [44]. Параметрите на настройка за анализи на проби бяха оптимизирани и зададени, както следва: напрежение на пръскане = 3500 V, дебит = 3 µl/min, налягане на газ за почистване на йони = 0,2 (произволни единици), газ в обвивката = 12 (произволни единици), допълнително налягане на газа = 6 (произволни единици) и капилярна температура = 270 ° C. Енергиите на сблъсъка за анализи на PC, LPC и сфингомиелини (SM) бяха определени на 28 eV. Енергиите на сблъсъка за анализи на холестерилови естери (CE) бяха определени на 25 eV, а на керамидите (CER) бяха определени на 32 eV. CEs бяха открити в режим на положителен йон чрез сканиране за неутрална загуба (NL) на холестадан (m/z 368,5). Содирани видове SM, PC и LPC бяха открити в режим на положителен йон чрез сканиране за NL на холин (m/z 59.1). FFA и PE бяха идентифицирани в режим на отрицателни йони чрез сканиране за проучване за [MH] - между m/z 200 и 900. Содираните видове TG бяха идентифицирани в режим на положителен йон чрез сканиране за проучване за [M + Na] + между m/z 800 и 1000. Всички анализирани данни бяха коригирани за 13 С изотопни ефекти, както е описано от Han et al. [44].

Статистически анализ

Данните бяха анализирани с помощта на софтуера GraphPad Prism (версия 5.0). Статистическата значимост за разликите между групите се определя чрез несдвоен t-тест. Резултатите се изразяват като средно ± стандартно отклонение (SD). Счита се, че разликите са статистически значими, ако свързаната стойност на P е Фигура 1. Фосфатидилхолин (PC) мастен ацилен състав на мишки, хранени с високо и ниско обогатено с n-3 PUFA диети.

Видовете PC в плазмата (A) и черния дроб (B) се определят количествено чрез измерване на содираните адукти на PC, използвайки ESI-MS в режим на положителен йон чрез NL сканиране за m/z 59.1, както е описано в „Методи“. Данните бяха коригирани за 13 С изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 2. Състав на свободни мастни киселини (FFA) на мишки, хранени с високо и ниско обогатено с n-3 PUFA диети.

Съставът на FFA на плазмата (A) и черния дроб (B) се определя количествено чрез измерване [M-H] - като се използва ESI-MS в режим на отрицателни йони между m/z 200 и 900. Данните бяха коригирани за 13 C изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 3. Лизофосфатидилхолин (LPC) мастен ацилен състав на мишки, хранени с високо и ниско обогатено с n-3 PUFA диети.

Видовете LPC в плазмата (A) и черния дроб (B) се определят количествено чрез измерване на содираните адукти на PC, използвайки ESI-MS в режим на положителен йон чрез NL сканиране за m/z 59.1, както е описано в „Методи“. Данните бяха коригирани за 13 С изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 4. Фосфатидилетаноламин (PE) мастен ацилен състав на мишки, хранени с високо и ниско съдържание на обогатени с n-3 PUFA диети.

Плазмените (A) и чернодробните (B) нива на PE видове бяха количествено определени чрез измерване [M-H] - използвайки ESI-MS в режим на отрицателни йони между m/z 200 и 900. Данните бяха коригирани за 13 C изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 5. Сфингомиелинов (SM) мастен ацилен състав на мишки, хранени с високо и ниско съдържание на n-3 PUFA обогатени диети.

Количествено се определят нивата на плазмата (A) и черния дроб (B) на видовете SM чрез измерване на содираните адукти на PC, използвайки ESI-MS в режим на положителен йон чрез NL сканиране за m/z 59.1, както е описано в „Методи“. Данните бяха коригирани за 13 С изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 6. Церамиден (CER) мастен ацилов състав на мишки, хранени с високо и ниско обогатено с n-3 PUFA диети.

Видовете CER на плазмата (A) и черния дроб (B) бяха количествено използвани ESI-MS в режим на отрицателни йони чрез NL сканиране за m/z 256.2. Данните бяха коригирани за 13 C изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 7. Холестерилов естер (CE) мастен ацилов състав на мишки, хранени с високо и ниско съдържание на n-3 PUFA обогатени диети.

Плазмените (A) и чернодробните (B) CE видове бяха количествено определени с използване на ESI-MS в режим на положителен йон чрез NL сканиране на m/z 368,5, както е описано в „Методи“. Данните бяха коригирани за 13 C изотопни ефекти. Данните са представени като средни (n = 6) ± SD и P-стойности, изчислени с помощта на несдвоен t-тест. * P Фигура 8. Триглицериден (TG) мастен ацилов състав на мишки, хранени с високо и ниско съдържание на n-3 PUFA обогатени диети.