Проф. Д-р Идрис Мехметоглу

определящ

Бийокимя АД, Мерам Тип Факултеси

42080 Коня (Турция)

Сродни статии за „“

  • Facebook
  • Twitter
  • LinkedIn
  • електронна поща

Резюме

Обективен: Измерихме модифициран от исхемия албумин (IMA), общ антиоксидантен статус (TAS), общ оксидантен статус (TOS) и високочувствителни нива на С-реактивен протеин (hsCRP) при лица със затлъстяване и нормално тегло, за да проучим дали IMA може да се използва като биомаркер на оксидативен стрес и възпаление и дали IMA е независима детерминанта на затлъстяването или не. Методи: Изследването е проведено върху 92 пациенти със затлъстяване (20 мъже, 72 жени) на възраст 38 ± 11 години и 78 контроли с нормално тегло (19 мъже, 59 жени) на възраст 37 ± 11 години. Измервани са нива на серумни липиди, IMA, TAS, TOS и hsCRP на пациентите. Резултати: IMA (p 2 = 0,139, p 2 = 0,136, p 2 = 0,120, p

Въведение

Затлъстяването е прекомерно натрупване на телесни мазнини, което представлява риск за здравето, което води до намалена продължителност на живота [1,2]. В допълнение към това, че служи като депо за съхранение на липидна енергия, мастната тъкан сега е призната за активен участник в енергийната хомеостаза и физиологични функции като имунитет и възпаление. Известно е, че мастната тъкан експресира и секретира различни продукти, известни като „адипокини“, включително лептин, адипонектин и резистин, както и цитокини и хемокини, като фактор на туморна некроза-алфа и интерлевкин-6. Освобождаването на адипокини води до хронично подвъзпалително състояние, което може да играе централна роля в развитието на инсулинова резистентност и захарен диабет тип 2 (DM) и може да бъде отговорно за повишения риск от сърдечно-съдови заболявания (ССЗ), свързани със затлъстяването [3 ]. В действителност се съобщава, че затлъстелите лица имат значително повишена заболеваемост и смъртност от тип 2 DM [2], ракови заболявания [4] и почти всички форми на ССЗ [5].

Исхемията, хипоксията, ацидозата и образуването на свободни радикали могат да променят способността на аминокрайния край (N-терминал) на молекулата на албумина да свързва преходни метали като кобалт, мед и никел [6,7,8]. Много проучвания оценяват клиничната полезност на модифициран от исхемия албумин (IMA) при пациенти със съмнения за остър коронарен синдром [8] и миокардна исхемия [9]. Също така се съобщава, че IMA се увеличава при заболявания, свързани със затлъстяването, като метаболитен синдром [10], хиперхолестеролемия [11] и тип 2 DM [12].

Оксидативният стрес може да възникне поради свръхпроизводство на оксиданти, намаляване на антиоксидантната защита или комбинация от тези фактори. Естествената антиоксидантна система се състои от антиоксидантни ензими и множество антиоксидантни съединения и защитава функционалните и структурните молекули срещу реактивните кислородни видове (ROS). Генерирането на ROS може поне временно да модифицира N-терминалната област на албумина, за да даде повишени нива на IMA [7]. Измерването на общия антиоксидантен статус (TAS) е прост показател за активността на всички антиоксиданти, докато общото оксидантно състояние (TOS) е показател за общия оксидативен стрес [13,14].

Наскоро беше показано, че затлъстяването намалява способността на албумина да свързва кобалт, което води до по-високи нива на IMA [15,16]. Няма обаче проучване, изследващо връзката между оксидативен стрес и биомаркери на възпалението като TAS, TOS и високочувствителен С-реактивен протеин (hsCRP) при затлъстели хора.

Следователно ние изследвахме как оксидативният стрес и възпалението влияят върху образуването на новия диагностичен маркер IMA чрез измерване на серумните нива на IMA, TAS, TOS и hsCRP и корелациите между тях при затлъстели пациенти. Освен това се опитахме да разберем дали IMA е независима детерминанта на затлъстяването. По този начин имаме за цел да изследваме молекулярната основа и усложненията на затлъстяването и да допринесем за стратегиите за превенция и лечение на затлъстяването.

Участници и методи

Субекти

92 пациенти със затлъстяване (20 мъже, 72 жени) на възраст 20–65 години (средно 38 ± 11 години) и 78 контроли с нормално тегло (19 мъже, 59 жени) на възраст 19–68 години (средно 37 ± 11 години) са включени в ученето. Антропометричните и клиничните характеристики на групите са дадени в таблица 1. Потенциалните субекти са изключени от участие в проучването, ако е отбелязано някое от следните състояния: СД, хронично чернодробно заболяване, хипертония, рак, възпалителни заболявания, сериозна дислипидемия или анамнеза на ССЗ. Систоличното кръвно налягане над 140 mm Hg и диастолното кръвно налягане над 90 mm Hg бяха определени като критерии за хипертония [17]. Контролите са хора с нормално тегло, съобразени с възрастта, с ИТМ между 18,5 и 24,9 kg/m 2 и без оплаквания или патологични лабораторни находки.

маса 1

Антропометрична и клинична характеристика на участниците, групирани според ИТМ a

ИТМ се измерва при всички участници като критерий за затлъстяване. ИТМ се получава чрез разделяне на теглото на човека (в кг) на квадрата на неговия или нейния ръст (в м). Субектите трябваше да носят само леки дрехи и да стоят изправени, боси и спокойни, когато се измерват. Както везните, така и стадиометърът са калибрирани преди употреба. Субектите с ИТМ между 25 и 29,9 kg/m 2 се считат за наднормено тегло, а тези с BMI ≥ 30 kg/m 2 се считат за затлъстели [1]. Обиколката на талията е използвана като централен индикатор за затлъстяване, като се имат предвид стойности, по-високи от 80 и 94 cm съответно за жена и мъж [18]. Обиколката на талията на участниците беше измерена с мека лента по средата между най-ниското ребро и гребена на илиаката. Обиколката на бедрото беше измерена в най-широката част на глутеалната област.

Протоколът за изследване е одобрен от Комитета по етика на Медицинското училище в Мерам, Университет в Селчук, Коня, Турция. Всички субекти бяха информирани за подробностите на проучването и беше получено писмено съгласие на всеки пациент.

Взети са проби от венозна кръв след състояние на гладно през нощта. Кръвните проби бяха обработени за рутинен анализ и серумите бяха замразени при –80 ° C в рамките на 2 часа от събирането на пробите за по-късно тестване на IMA, TAS и TOS. Нивата на липидите в кръвта, hsCRP и глюкозата се измерват с рутинни методи на автоанализатор (Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA), а нивата на инсулин се определят чрез рутинен метод на хемилуминесценция на анализатор E170 (Roche Diagnostics, Rotkreuz, Швейцария) на същия ден на вземане на проби. За оценка на степента на инсулинова резистентност се използва модел на хомеостаза за оценка на инсулинова резистентност (HOMA-IR) и се изчислява чрез уравнения, дадени от Mathews et al. [19].

Измерване на нивата на IMA

Нивата на IMA са измерени чрез колориметричен анализ, разработен от Bar-Or et al. [9] въз основа на измерване на несвързан кобалт след инкубация със серум на пациента. Повишените количества IMA водят до по-малко свързване на кобалт и повече остатъчен несвързан кобалт, наличен за комплекс с хромоген (дитиотреитол (DTT)), който може да бъде измерен фотометрично. Процедурата беше следната:

50 ul 1% кобалтов хлорид се добавят към 200 ml серум, внимателно се смесват и се инкубират в продължение на 10 минути, за да се осигури адекватно свързване на кобалт-албумин. 50 ul DTT, при концентрация 1.5 mg/ml, се добавят като оцветител; реакцията беше спряна 2 минути по-късно чрез добавяне на 1.0 ml 0.9% NaCl. Оцветеният продукт се измерва при 470 nm и се сравнява със серумно-кобалтова заготовка без DTT; резултатите са докладвани в абсорбционни единици (ABSU). Дисперсионният коефициент на интра-анализ и между анализите (CV) за IMA бяха изчислени чрез повтаряне на проба от пациент в осем анализа в два екземпляра и бяха установени съответно 6,5% и 8,7%.

Измерване на TAS

TAS на серумите се определя с помощта на наличен в търговската мрежа комплект (Rel Assay Diagnostic, партида: RL015, Gaziantep, Турция), който се основава на избелването на характерния цвят на по-стабилен 2,2'-азино-бис (3-етилбенз- тиазолин-6-сулфонова киселина) (ABTS) радикален катион от антиоксиданти [13]. Резултатите са изразени в mmol еквиваленти на Trolox/l. Вътрешно-пробното и между-пробното CV за TAS са съответно 1,3% и 1,5%. Чувствителността на анализа е 0,04 mmol еквиваленти на Trolox/l.

Измерване на TOS

TOS на серумите се определя с помощта на наличен в търговската мрежа комплект (Rel Assay Diagnostic, обособена позиция: RL015), който се основава на окисляване на железен йон-О-дианизидинов комплекс до железен йон от окислители, присъстващи в пробата. Реакцията на окисление се засилва от глицериновите молекули, които присъстват в изобилие в реакционната среда. Фериевият йон прави оцветен комплекс с ксиленол оранжев в кисела среда. Интензивността на цвета, която може да бъде измерена спектрофотометрично, е свързана с общото количество оксидантни молекули, присъстващи в пробата. Анализът се калибрира с водороден пероксид (H2O2) и резултатите се изразяват в µmol H2O2 еквиваленти/l [14]. Вътрешно-тестовите и междуаналитичните CV за TOS са по-ниски от 3%. Чувствителността на анализа беше 1,13 µmol H2O2 еквиваленти/l.

Статистически анализ

Таблица 3

Съотношения на маркери на оксидативен стрес и антропометрични променливи с липиден профил и hsCRP на групите a