Кореспонденция на: Cheng-Xin Wang, Катедра по патология и патофизиология, Факултет по медицина и науки за живота, Университет Дзянхан, Ухан 430056, провинция Хубей, Китай. nc.moc.oohay@0002nixgnehcgnaw

Телефон: + 86-27-82411803 Факс: + 86-27-82411803

Резюме

ЦЕЛ: Да се ​​изследват ултраструктурните и морфологични промени на неспецифичния дуоденит (NSD) в опит да се степенуват според степента на лезиите.

МЕТОДИ: Взети са биопсии от лигавицата на луковицата на дванадесетопръстника на 44 пациенти, избрани от пациентите, подложени на горна стомашно-чревна ендоскопия за епигастрални дискомфорти. От всеки пациент са получени две щипкови биопсии на една и съща област от дуоденална крушка. Едната беше за сканираща електронна микроскопия, а другата беше оцветена с хематоксилин-еозин, Warthin-Starry сребро и след това и двете бяха изследвани под светлинен микроскоп. Общо 12 проби (три от всяка степен на нормалното и I-III на НСД, диагностицирани и класифицирани по хистология), избрани от 44-те пациенти, бяха дехидратирани, изсушени в критична точка, покрити със златен паладий и изследвани под сканиране JEOL JSM-30 електронен микроскоп (SEM) при 20 kV.

РЕЗУЛТАТИ: Според ултраструктурните морфологични промени, неспецифичният дуоденит е разделен на нормална (като контролна група), лека, умерена и тежка степен според резултатите от SEM. Нормалните власинки на луковицата на дванадесетопръстника са под 0,2 mm. На повърхността на лигавичния епител имаше възпалителни клетки, понякога червени кръвни клетки и макрофаги. Може да се наблюдава ерозия и десквамация на епитела. Три случая (25%, 3/12) са имали стомашна метаплазия и инфекция с Helicobacter pylori (H pylori) може да бъде открита в 5 случая (41,67%, 5/12) в лигавицата на дванадесетопръстника. Най-отличителната черта е дефект, подобен на язва на повърхността на епителните клетки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Неспецифичният дуоденит е отделна болест, причинена от различни фактори. SEM е от значение като помощ при диагностицирането на лигавични заболявания на дванадесетопръстника.

ВЪВЕДЕНИЕ

Хроничният дуоденит е често срещано заболяване, което може да бъде отделна единица или придружено с язва на дванадесетопръстника и също така често срещан клиничен симптом на диспепсия [1,2]. Хроничният дуоденит може да бъде разделен на три типа според техните ендоскопски, хистологични и етиологични находки [3]. Хистологично хроничният дуоденит е разделен на две основни форми: първична (неспецифичен дуоденит, NSD) форма, която обикновено е ограничена до луковицата на дванадесетопръстника и първата част на дванадесетопръстника [4], и вторична (специфична) форма, която е установена заедно с различни други разстройства като болест на Crohn, саркоидоза, аспириниране и стрес [3]. Диагнозата NSD често се поставя както ендоскопски, така и хистопатологично и много научни статии го документират [3-13]. Рядко се съобщава за ултраструктурно морфологично изследване на NSD със сканиращ електронен микроскоп. Затова проведохме настоящото проучване върху ултраструктурните промени на неспецифичния дуоденит.

МАТЕРИАЛИ И МЕТОДИ

Материали

Множество биопсии от 44 пациенти, избрани от пациентите, които са били подложени на рутинна ендоскопия на горната част на стомашно-чревния тракт по различни причини, включително болка или дискомфорт в епигастриума, киселини и т.н., са взети от луковицата на дванадесетопръстника на лигавицата. Пациенти с активен дуоденит и язва на дванадесетопръстника бяха изключени от това проучване. Проби за SEM са получени от 12 от 44 пациенти, пет жени и седем мъже с възрастови граници 19-62 години и средна възраст 37.0 ± 12.9 години. Не е направен опит за съпоставяне на морфологичните промени с клиничните симптоми.

Методи

Биопсиите се получават чрез ендоскопски биопсични форцепс директно в ендоскопски анормалната лигавица във всяка област или произволно на мястото, ако лигавицата изглежда нормална от луковицата на дванадесетопръстника. При всяка ендоскопия бяха получени две щипкови биопсии в една и съща област от лигавицата на дванадесетопръстника. Единият беше за SEM, другият за светлинна микроскопия. След това всеки образец за биопсия беше ориентиран.

Материалът, използван за светлинна микроскопия, беше незабавно фиксиран в 40 g/L формалдехид, дехидратиран в градуирана серия от разтвор на етилов алкохол, вграден в парафин и нарязан на участъци с дебелина 3-4 μm. Тези проби се оцветяват с хематоксилин-еозин, Warthin-Starry сребро (за идентифициране на инфекцията с H pylori) и след това се изследват със светлинна микроскопия. Всички хистологични изследвания са извършени сляпо, независимо от ендоскопската диагноза от един патолог. Според степента на лезиите неспецифичният дуоденит е разделен на нормална (като контролна група), лека, умерена и тежка степен, съответно по отношение на класификацията и литературата на Whitehead [1-3,5-7].

Общо 12 проби (по три от всяка степен на НСД, диагностицирани и степенувани по хистология), избрани за SEM, се поставят незабавно в 25 g/L глутаралдехид във фосфатен буфер, рН 7,4. След фиксиране и отстраняване на слуз, тъканите се дехидратират в степенувана поредица от ацетон, критична точка се суши, като се използва течен въглероден диоксид като обменна среда. След като се монтират върху стърнища с помощта на бързосъхнеща сребърна боя, образците се разпръскват със златен паладий с дебелина приблизително 25 nm и се изследват под сканиращ електронен микроскоп JEOL JSM-30 при 20 kV.

РЕЗУЛТАТИ

лигавицата дванадесетопръстника

Фотомикрография на сканираща електронна микроскопия на неспецифичен дуоденит. A: Вълни в униформени форми на листен или пръстови модел на нормална лигавица на дванадесетопръстника. × 200; Б: Деформирани и интегрирани власинки (звездичка) и ексудати (стрелка) при степен II на НСД. × 100; В: Разширени, сплескани, извити или мозъчни вили, маси или лентовидна слуз (стрелки), язвен дефект на повърхността на вилус (дълга стрелка) при степен II на НСД. × 100; D: Дефект, подобен на язва (звездичка) и няколко от H pylori (стрелки) в слуз. × 2500; E: Слуз и тежка ерозия на повърхността на лигавицата в степен III на NSD. × 500; F: Макрофаги (дълга стрелка) и възпалителни клетки (стрелки) на повърхността на лигавицата и клетки на стомашната метоплазия (звездичка). × 2200; G: H pylori в S-образна форма върху микровилините на епителните клетки (стрелки). × 3200.

ДИСКУСИЯ

Ендоскопските и хистологичните промени на възпалението, често възникващи в лигавицата на дванадесетопръстника, във връзка с пептична язва и подобни промени при липса на откровена язва се наричат ​​неспецифичен дуодинит и общ дуоденит, хроничен дуоденит, пептичен дуоденит, гастродуоденит и др.

Съществуват различни методи за класификация на NSD, включително клинични, ендоскопски и хистологични класификации. Що се отнася до степенуването на NSD съгласно SEM, има малко доклади в литературата, с изключение на няколко статии, които описват морфологичните характеристики на повърхността на ворсинките и бактериите на епителната повърхност на гастродуоденалната лигавица [7,17,18]. Класирането на NSD чрез светлинна микроскопия се основава на броя на възпалителните клетки [6,7], докато класифицирането на NSD чрез сканираща електронна микроскопия се основава на морфологичните промени на повърхността на лигавицата на луковицата на дванадесетопръстника, както е разкрито в това проучване.

Противоречието дали NSD е отделна единица или е само стадий на язвена болест е объркано от противоречивите наблюдения, че при някои пациенти дуоденитът е прогресирал до язва на дванадесетопръстника, докато при други не. Scott et al [6] са направили контрастно проучване на 16 двойки пациенти със и без язва на дванадесетопръстника, което точно съвпада с степента на дуоденит и резултатите подкрепят сходството на двете състояния. Нашето друго проучване на NDS с броя на възпалителните клетки на lamina propria показва значителна промяна в степента I-III на NSD в сравнение с нормалното. Тази статия показва, че NSD също може да бъде разделена на нормална и степен I-III от SEM. Тези резултати биха могли да потвърдят мнението, че NSD е отделна болест, основана на ултраструктурна морфология.

В заключение, SEM е от значение като помощ при диагностицирането на биопсии на лигавицата на дванадесетопръстника и може да подобри диагностичните критерии на NSD.

ПРИЗНАВАНИЯ

Благодарни сме на професор Xiao-Nan You, Факултет по чужди науки, Университет Хубей, за нейното любезно съдействие при езиковото обучение на тази статия.