PD д-р Керстин Бенц

бъбречни

Департамент по педиатрия, Университет в Ерланген-Нюрнберг

Loschgestr. 15, D-91054 Erlangen (Германия)

Сродни статии за „“

  • Facebook
  • Twitter
  • LinkedIn
  • електронна поща

Резюме

Цели: За да тестваме предполагаемата връзка с нисък нефронен брой и по-късно развитие на бъбречни и сърдечно-съдови заболявания, ние изследвахме ефектите от диета с високо съдържание на натрий при хетерозиготни GDNF +/- мишки. Методи: Възрастните мишки от див тип и GDNF +/- бяха групирани заедно според диетата с високо съдържание на натрий (HS, 4%) или с ниско съдържание на натрий (LS, 0,03%) в продължение на 4 седмици. Сърцето, аортата и бъбреците са обработени за морфометрични и стереологични оценки и TaqMan PCR. Резултати: На HS GDNF +/- мишките показват значително по-висок обем на пиене и производство на урина от теглото и средното артериално кръвно налягане обикновено е по-високо. Сърдечното тегло е било по-високо при GDNF +/-, отколкото при тегловно, но разликата е била значима само за LS. HS значително увеличава сърдечната интерстициална тъкан при GDNF +/-, но не и в теглото. На LS GDNF +/- мишките имаха значително по-големи гломерули от wt и HS доведоха до допълнително двукратно увеличение на гломерулната площ в сравнение с LS. При електронна микроскопия се наблюдава гломерулно увреждане след HS при GDNF +/-, но не и при тегловно. Диетичен прием на сол, модулирана експресия на бъбречен IL-10 ген в GDNF + /-. Заключение: В условията на 30% по-нисък нефронен брой HS диетата благоприятства дезадаптивните промени на бъбреците, както и на сърдечно-съдовата система.

Въведение

По този начин, обобщено има данни за хора в специфични популации, подкрепящи хипотезата на Бренър за недодозиране на нефрон като една потенциална причина за есенциална хипертония, но нито известните патомеханизми, нито модулаторните ефекти на хранителните фактори, т.е. високият прием на сол, са известни. Следователно целта на настоящото проучване е да се изследват ефектите от модифицирането на хранителната сол чрез диета с ниско и високо съдържание на сол в модела GDNF +/- с 30% по-нисък нефрон върху сърдечно-съдовата и бъбречната структура и функция. Нещо повече, ние имахме за цел да анализираме промените в тези регулаторни системи, които биха могли да участват в манипулацията с натрий, когато приемът на сол варира в условията на ниско нефроново число, т.е. ренин ангиотензиновата система (RAS), ендотелиновата (ET) система, някои възпалителни маркери и избрани тръбни транспортери на натрий.

Материали и методи

Подготовка на животни и тъкани

GDNF +/- мишките първоначално бяха любезно предоставени от проф. К. Криглщайн и д-р С. Херман, Катедра по невроанатомия, Университет в Гьотинген, Германия. Моделът на мишката първоначално е описан от Pichel et al. [13]. Тъканта на опашката се получава при отбиване за генотипиране, като се използва PCR анализ, както е описано по-горе [14]. Всички експерименти с животни са извършени в съответствие с насоките на Американското физиологично общество и са одобрени от местните държавни власти (Regierung von Mittelfranken, AZ # 54-2531.31-3/07).

В първо експеримент 34 GDNF +/- (15 мъжки, 19 женски) мишки бяха използвани с 35 диви типа C57B6 (тегловни, 15 мъжки, 20 женски), служещи като контроли. Мишките бяха настанени при поддържани условия (22 ± 2 ° С, 12-часов цикъл тъмно/светлина). В началото на експеримента мишките бяха разпределени на случаен принцип в 2 различни групи за лечение. Една животинска група (16 GDNF +/-, 19 див тип) е получавала диета с високо съдържание на сол (HS, 4%) и 0,9% физиологичен разтвор като питейна вода; другата група (18 GDNF +/-, 16 див тип) е получавала диета с ниско съдържание на сол (LS), съдържаща 0,03% сол и нормална чешмяна вода. И двата режима са дадени за период от 4 седмици. Преди да бъдат убити, всички мишки са оборудвани с катетър на каротидната артерия под изофлуранова анестезия и вътреартериалното кръвно налягане е измерено на съзнателни мишки 2 часа след анестезията [15]. След това и двата бъбрека бяха взети за хистологичен анализ и оценка на експресията на иРНК. От горните животни, които предимно са били на възраст 49-53 седмици, групата на по-младите животни (n = 3 на група, на възраст 27-34 седмици) е използвана за определяне на серумните нива на алдостерон с помощта на радиоимуноанализ (Radim Aldosterone MAIA; Radim Deutschland GmbH, Германия) [16]. След вземането на кръв тези животни бяха перфузионно фиксирани с глутаралдехид, както е описано по-долу.

Имунохистохимия

Морфологични изследвания на бъбреците

Всички морфологични изследвания са извършени по заслепен начин, т.е. наблюдателят не е знаел за експерименталния протокол.

Интраренални артерии. Плътността на дължината (Lv) на бъбречните кортикални артерии се определя съгласно уравнението Lv = c * QA при увеличение от 200x. Накратко, на парафинови сечения QA се определя като броя на съдовете на кортикална площ. Площта и луменът на кортикалните съдове бяха определени с помощта на контур и полуавтоматизирана система за анализ на изображения (Soft Imaging Systems, Мюнстер, Германия). Във всички SMA оцветени бъбречни секции бяха измерени минималният и максималният диаметър на съдовете (Dmin и Dmax, съответно); c се определя като Dmin/Dmax. Площта на кораба Avessel и луменната зона Alumen бяха определени с уравненията Avessel = π * (Douter/2) 2 и Alumen = π * (Вечеря/2) 2, съответно (Douter: разстояние от едното външно място на съда до противоположното място; Вечеря: разстояние от едното вътрешно място на съда до противоположното място; Dmax = Douter - Вечеря при най-големия диаметър на съда, Dmin: Douter - Вечеря при най-малкия диаметър на съда). Луменът на съдовете се изчислява като разлика на двата.

Морфологични изследвания на сърцето

PCR в реално време на бъбреците

Анализ на данните

маса 1

Данни за животни - телесно тегло, тегло на бъбреците и серумни параметри