Молекулярна
Лекарство
Доклади

• Последните две години
• Обща сума

• Миналата година 0
• Обща сума

• Миналият месец
• Изминалата година
• Обща сума

• Хонг Слънце
• Синю Шао
• Jiajia He
• Михал Голос
• Бимин Ши

Тази статия се споменава в:

Резюме

Въведение

Последните статистически данни от Центровете за контрол на заболяванията, Националните здравни институти и Световната здравна организация съобщават, че затлъстяването се е увеличило повече от два пъти от 1980 г. насам и почти два милиарда възрастни по цял свят са с наднормено тегло или затлъстяване (1). Затлъстяването е предотвратимо заболяване; очевидно е обаче, че настоящите образователни усилия не са успели да противодействат на възходящата му тенденция. Нарастващата епидемия от затлъстяване в света е основен фактор за намаляване на продължителността на живота и представлява икономическа тежест и сериозен здравословен проблем. Той до голяма степен е отговорен за нарастващата честота и разпространение на диабета, както и на сърдечно-съдовите и бъбречните заболявания. Данните сочат, че затлъстяването е рисков фактор за развитието на бъбречно възпаление и дисфункция, което може да прогресира към хронично бъбречно заболяване (ХБН) (2,3).

Като се има предвид, че затлъстяването е свързано с хронично нискостепенно възпалително състояние и че проучванията показват, че индуцираното от затлъстяването възпаление се развива в бъбречния тубуларен интерстициум (4), изследването на механизмите на бъбречната тубулоинтерстициална възпалителна реакция при затлъстяване може да бъде от особено значение. Множество реплики показват, че прякото действие на моноцитния хемоаттрактант протеин-1 (MCP-1) е мощен стимулатор на тубулоинтерстициално възпаление (5,6). Прекомерният MCP-1 в бъбречния интерстициум може да вербува макрофаги и да генерира възпаление, допринасяйки за тубулоинтерстициално увреждане и прогресиране на ХБН. Първоначално циркулационният MCP-1, произведен и секретиран от мастна тъкан, е бил във фокуса на вниманието като корен на тубулоинтерстициалното възпаление. Съобщава се обаче, че концентрациите на серумен и пикочен MCP-1 не са свързани помежду си при затлъстяване, което показва роля на локално произведения MCP-1 в бъбреците (7). Следователно, изследването на механизмите на бъбречното генериране на MCP-1 може да бъде полезна стъпка в разбирането и разработването на нови методи за лечение на човешко бъбречно тубулоинтерстициално възпаление.

В настоящото проучване бъбречната функция първоначално беше оценена при участниците със затлъстяване, а патоморфологията и свързаните с нея механизми на тубулоинтерстициално възпаление бяха оценени в модела на затлъстели плъхове, индуциран с високо съдържание на мазнини (HFD) и култивирана човешка бъбречна тубулна епителна клетъчна линия ( HK-2). Целта на настоящото проучване беше да даде представа за появата на свързано със затлъстяването бъбречно тубулоинтерстициално възпаление и да идентифицира потенциален нов подход за лечение на бъбречно увреждане.

Материали и методи

Клинично проучване

Клетъчна култура

HK-2 клетки и клетъчна линия от човешки моноцити (THP-1) са получени от Американската колекция от типови култури (Manassas, VA, USA). Клетките HK-2 и THP-1 се култивират при 37 ° C в среда RPMI 1640 (Lonza Group, Ltd., Базел, Швейцария), съдържаща 10% фетален телешки серум (HyClone; GE Healthcare Life Sciences, Logan, UT, USA), 2 mM разтвор на L-глутамин, 100 U/ml пеницилин и 100 µg/ml стрептомицин (Sigma-Aldrich; Merck KGaA), в инкубатор за клетъчни култури с 95% въздух и 5% CO 2 за 24 часа. Всички експерименти бяха проведени в безсерумна среда RPMI 1640, съдържаща 0,2% говежди серумен албумин (BSA; Sigma-Aldrich; Merck KGaA). Тъй като палмитиновата киселина (PA; Sigma-Aldrich; Merck KGaA) е основна съставка на FFA, тя е била използвана за лечение на клетки и симулиране на среда с високо съдържание на мазнини в проучването in vitro (22,23).

Анализ на миграцията на Transwell филтър и откриване на концентрация на MCP-1

Малка интерферираща (si) РНК трансфекция

Клетките HK-2 бяха култивирани в шест-ямкови плаки с плътност 5 × 10 5 клетки/ямка и временно трансфектирани с mTOR siRNA (смисъл, 5′-CCACCCGAAUUGGCAGAUUTT-3 ′; антисенс, 5′-AAUCUGCCAAUUCGGGUGGTT-3 ′), FOXO1 siRNA (смисъл, 5′-GGAGGUAUGAGUCAGUAUATT-3 ′; антисенс, 5′-UAUACUGACUCAUACCUCCTT-3 ′) или празна векторна siRNA (кат. No sc-35409 и sc-35382; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TX, САЩ), използвайки Lipofectamine ® 2000 (Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) следвайки протокола на производителя. Накратко, 1 ug siRNA се смесва с 6 ul Lipofectamine ® 2000 и се прилага върху клетките. Трансфектираните клетки се инкубират при стайна температура в продължение на 30 минути и след това се посяват (5 х 105 клетки) в 6-ямкова плака, съдържаща 900 ul Opti-MEM (Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.). След 24-часова обработка с експериментална среда, клетките се събират и изследват чрез Western blot.

Екстракция на протеини и Western blot анализ

Статистически анализ

Фигура 1.

Корелацията на Пиърсън между нивата на u-MCP-1 и FFA, UACR и u-NGAL при пациенти със затлъстяване. u-MCP-1, уринарен моноцитен хемоаттрактант протеин-1; FFA, свободна мастна киселина; UACR, съотношение албумин в урината към креатинин; u-NGAL, липокалин, свързан с урината неутрофилна желатиназа.

Таблица I.

Изходни характеристики на субекти със затлъстяване и затлъстяване.

• Разпространение и фактори, свързани с наднорменото тегло и централното затлъстяване сред възрастните в източната част
• Нашата роля в борбата със затлъстяването
• Наднорменото тегло и затлъстяването от средната възраст са свързани със съкратения вътрешен летопис
• Пълнотекстови COVID-19 с хранителни вещества Връзката за възпаление и ролята на храненето в потенциал
• Брой деца, свързани със затлъстяването при жени и мъже на средна възраст Резултати от здравето и