Резюме

ОБЕКТИВЕН-Да се ​​изчисли отделното въздействие на затлъстяването и хиперликемията върху инкретиновия ефект (т.е. увеличаването на функцията на β-клетките след перорална глюкоза спрямо интравенозна глюкоза).

толерантността

ПРОЕКТИРАНЕ И МЕТОДИ НА ИЗСЛЕДВАНИЯ -Изогликемично перорално (75 g) и интравенозно приложение на глюкоза се извършва при 51 пациенти (24 с нормален глюкозен толеранс [NGT], 17 с нарушен глюкозен толеранс [IGT] и 10 с диабет тип 2) с широк диапазон на ИТМ (20– 61 kg/m 2). Използвана е деконволюция на С-пептид за възстановяване на скоростта на секреция на инсулин и чувствителността на β-клетките към глюкоза (наклон на кривата доза-отговор на секрецията на инсулин/концентрация на глюкоза) е определена чрез математическо моделиране. Ефектът на инкретин се определя като съотношението орално-интравенозно на отговорите. При 8 пациенти с NGT и 10 с диабет, външният вид на глюкоза през устата е измерен чрез техниката на двойно проследяване.

РЕЗУЛТАТИ—Енкретиновият ефект върху общата секреция на инсулин и чувствителността на β-клетъчната глюкоза и отговора на GLP-1 към пероралната глюкоза са значително намалени при диабет в сравнение с NGT или IGT (P ≤ 0,05). Резултатите са сходни, когато субектите са стратифицирани по BMI tertile (P ≤ 0,05). В целия набор от данни всяка проява на инкретиновия ефект е обратно свързана както с глюкозния толеранс (2-часови нива на глюкоза в плазмата), така и с ИТМ (частичен r = 0,27–0,59, P ≤ 0,05) по независим, адитивен начин. Появата на орална глюкоза не се различава между диабета и NGT и е положително свързана с отговора на GLP-1 (r = 0,53, P 2 H2] -глюкоза (Cambridge Isotype Laboratories, Бостън, Масачузетс) ([28 μmol/kg × [гликемия на гладно)/5] - прайм, последван от 0,28 μmol/kg инфузия) се прилага през целия базален период (-180 до 0 минути) и по време на OGTT (0-180 минути). По време на 0 участниците изпиват 75-g глюкозен разтвор съдържащ 1,5 g [1- 2Н] -глюкоза.

Анализи.

Глюкозата в плазмата се измерва с техниката на глюкозната оксидаза (Beckman Glucose Analyzers; Beckman, Fullerton, CA). Плазменият инсулин се измерва в два екземпляра чрез радиоимуноанализ, като се използва комплект за човешки инсулин с незначителна кръстосана реактивност с проинсулин и неговите разделени продукти (Linco Research, St. Louis, MO). Глюкагонът и С-пептидът са измерени чрез радиоимуноанализ (Linco Research). Плазменият триглицерид и серумният HDL холестерол се анализират в два екземпляра чрез стандартни спектрофотометрични методи на Synchron Clinical System CX4 (Beckman). Общият COOH-терминиран амидиран GLP-1 се анализира чрез радиоимуноанализ, използвайки поликлонален антисерум №. 89390 (отгледан при зайци), който има абсолютно изискване за амидирания С-край на GLP-1 и не реагира кръстосано с С-крайно пресечени метаболити или с удължени с глицин форми. Анализът кръстосано реагира с обогатяване с 2Н2] глюкоза и [1- 2Н] -глюкоза се измерва чрез газова хроматография/масспектрометрия.

Изчисления.

Инсулиновата чувствителност се изчислява от плазмената глюкоза и инсулиновите отговори към перорално натоварване с глюкоза чрез изчисляване на индекса на орална глюкозна инсулинова чувствителност, за който преди е доказано, че е добре корелиран със стойността М от евгликемично-хиперинсулинемичната скоба (30) Площите под кривите на времевата концентрация (AUC) са изчислени по правилото на трапеца. За да оценим размера на инкретиновия ефект, използвахме съотношението на орални към интравенозни мерки (6). Това изчисление отменя въздействието на нивата на глюкоза, сами по себе си, които са съчетани по протокол.

Моделиране на β-клетъчна функция.

Статистически анализ.

Данните са дадени като средни стойности ± SD или медиана (интерквартилен диапазон) за ненормално разпределени променливи. Последните бяха трансформирани в естествените си логаритми за използване при статистически тестове. Груповите различия бяха анализирани от ANOVA; различията в отделните групи бяха анализирани чрез теста на Bonferroni-Dunn. Стойностите на сдвоените групи бяха сравнени чрез теста на Wilcoxon. Разликите във времевия ход между групите бяха анализирани чрез двупосочна ANOVA за повтарящи се мерки. Моделите на линейна регресия бяха тествани със стандартни техники. Корекцията за ковариати е извършена от ANCOVA. Стойността на P ≤ 0,05 се счита за статистически значима; когато post hoc извършва множество сравнения; стойността P е разделена на броя на сравненията.

РЕЗУЛТАТИ

Групите с NGT, IGT и диабет имат сходно възрастово и полово разпределение, ИТМ и мастна маса. А1С и серумните триглицериди са по-високи при диабет, а инсулиновата чувствителност е намалена както при IGT, така и при диабет (Таблица 1). Концентрациите на глюкоза на гладно и след OGTT са по-високи при IGT и диабет, отколкото при NGT и по дизайн са практически идентични по време на OGTT и изогликемичния тест във всяка група (фиг. 1). Отговорът на плазмения инсулин към пероралната глюкоза е по-висок при IGT и по-нисък при диабет в сравнение с NGT. Скоростта на секреция на инсулин на гладно е била увеличена при диабет (медиана 115 [интерквартилен диапазон 53]) спрямо субекти с NGT (86 [81] pmol · min −1 · m −2; P 2 срещу 67 [21] nmol/m 2 vs. 67 [38] nmol/m 2), но забавено при диабет (P −1 · m −2 · mmol −1 · l, P = 0.03, срещу 1.482 [1,589] pmol · min −1 · m −2 · mmol - 1 · 1 за NGT); въпреки това, инкретиновият ефект (съотношението на орални към интравенозни стойности) не се различава в зависимост от състоянието на толерантност към глюкозата. По същия начин инкретиновият ефект върху потенцирането (като единична стойност за 2 часа спрямо изходното ниво) е сходен при групите.

С OGTT плазмените нива на GLP-1 са сходни при IGT и NGT, но значително намаляват при диабет, докато плазмените концентрации на GIP са по-високи при диабет, отколкото при NGT или IGT, с бърз отговор и забавен пик. Плазмените нива на глюкагон са сходни при NGT и IGT, но са значително по-високи при диабет, който показва парадоксално покачване 30 минути в OGTT (фиг. 3). Нито GLP-1, нито GIP се променят значително по време на интравенозния тест, докато глюкагонът е еднакво потиснат във всички групи (данните не са показани). Анализът на хормоналните AUC е представен в таблица 2.

В подгрупата, получаваща протокола за двойно проследяване, оралната глюкоза все още се появява в системната циркулация на 180 минути при значителни скорости (средно 16 ± 10 μmol · min −1 · kgFFM -1). Количеството орална глюкоза, което се появява през 3 часа на OGTT, възлиза на 43 ± 7 g при диабет и 47 ± 11 g при NGT (P = NS); през същия период от време плазменият глюкозен клирънс е бил значително намален при диабет (2,3 ± 0,4 срещу 4,2 ± 1,4 ml · мин -1 kggMFM -1; P 2 = 5,6, P = 0,2) (Таблица 3). Както се очакваше, чувствителността към инсулин беше прогресивно по-ниска, а нивата на инсулин и нивата на секреция (на гладно и постглюкоза) бяха прогресивно по-високи с увеличаване на ИТМ (Таблица 4). Въпреки това, чувствителността на β-клетъчната глюкоза е сходна при всички ИТМ с орална глюкоза и се увеличава донякъде при интравенозна глюкоза. Чувствителността и потенцирането на скоростта са сходни при групите с ИТМ. Отговорът на GLP-1, но не и GIP или глюкагоновият отговор, е бил нарушен с увеличаване на ИТМ.

Инкретини и инкретинов ефект.

Енкретиновият ефект се анализира отделно за общата секреция на инсулин и чувствителността на бета-клетъчната глюкоза. И за двата параметъра инкретиновият ефект е значително отслабен във връзка с диабета (фиг. 2). Когато се анализира чрез индекси на ИТМ, инкретиновият ефект върху общата секреция на инсулин е прогресивно по-нисък с по-висок ИТМ (съотношение перорално към интравенозно = 1,8 ± 0,6 срещу 1,4 ± 0,3 срещу 1,1 ± 0,2; P = 0,0002); същото важи и за инкретиновия ефект върху чувствителността на бета-клетъчната глюкоза (2,1 ± 1,0 срещу 1,6 ± 0,8 срещу 1,3 ± 0,5; P = 0,02). При двувариантния анализ въздействието на ИТМ и глюкозния толеранс са независими един от друг. Използвайки непрекъснати променливи, инкретиновият ефект върху общата секреция на инсулин е едновременна функция на ИТМ (частичен r = -0,59, P 2 и за 2-часови нива на глюкоза, съответстващи на медианата на групите с NGT, IGT и диабет. прогнозираните стойности ясно илюстрират адитивния ефект на затлъстяването и IGT върху инкретиновите ефекти върху общата секреция на инсулин и чувствителността на бета-клетъчната глюкоза (Фиг. 4).

Обща секреция на инсулин и чувствителност на β-клетъчна глюкоза в отговор на орална (□) и интравенозна (▪) глюкоза в трите групи. * P ≤ 0,05 за разликата между орално и интравенозно (тест на Wilcoxon). §P ≤ 0,05 за разликата от групата с NGT (тест на Bonferroni-Dunn).