ЮН-ЧАН ЮНГ

1 Институт за изследвания и развитие, Chaon Corp., Seongnam, Република Корея

екстракта

WOO HYUN KIM

1 Институт за изследвания и развитие, Chaon Corp., Seongnam, Република Корея

BOK KEE MIN

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

JAE YOUNG CHO

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

HYO JEONG СИН

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

JA YOUNG LEE

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

JI-YOUNG KIM

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

SAE-BOM KWON

2 Nova K Health Corp., Сеул, Република Корея

QIANG LI

1 Институт за изследвания и развитие, Chaon Corp., Seongnam, Република Корея

HEE-WOO LEE

1 Институт за изследвания и развитие, Chaon Corp., Seongnam, Република Корея

Резюме

Предистория/цел: Бързото нарастване на броя на хората с наднормено тегло или затлъстяване, което увеличава риска от заболявания и здравословни проблеми, се превръща във важен въпрос. Тук изследвахме дали екстрактът от маслинови листа (OLE) има мощни ефекти срещу затлъстяване при индуцирани с високо съдържание на мазнини модели мишки. Материали и методи: Мишките C57BL/6 са рандомизирани в нормален контрол, диета с високо съдържание на мазнини (HFD), HFD с OLE и HFD с групи гарциния и са прилагани експериментални диети в продължение на 12 седмици. Телесното тегло и приемът на храна се измерват веднъж седмично и свързаните със затлъстяването биомаркери се оценяват в серума и мастната тъкан. Резултати: OLE значително потиска наддаването на тегло, съотношението на ефективността на храната, натрупването на висцерална мазнина и серумния липиден състав при HFD-индуцирани мишки. Освен това, експресията на молекули, свързани с адипогенеза и термогенеза, е намалена в групата, третирана с OLE. Заключение: OLE предотвратява развитието на затлъстяване, като регулира експресията на молекули, участващи в адипогенезата и термогенезата.

Екстрактът от маслинови листа (OLE) се използва широко в диетата на човека и има различни ползи за здравето. OLE съдържа някои полифеноли, общи с маслиновите плодове и маслото и е доказано, че предотвратява хипертония, атеросклероза, рак, диабет и сърдечно-съдови заболявания (18-23). В това проучване ние изследвахме in vivo превантивните ефекти на OLE върху затлъстяването при диети, хранени с високо съдържание на мазнини, чрез оценка на експресията на молекули, участващи в адипогенезата и термогенезата.

Материали и методи

Материали. OLE е осигурен от Nova K health (Сеул, Корея). Съединението се съхранява при 4 ° С и се суспендира в стерилен физиологичен разтвор с фосфатен буфер (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA). Екстрактът от гарциния се предоставя от Nova K health и се прилага на мишки в положителната контролна група.

Животни. Пет седмици мъжки мишки C57BL/6 с тегло 18-21 g са закупени от Orient Bio (Gyeonggi-do, Корея). Всички мишки бяха настанени в специфично стандартно помещение без патогени при контролирана температура (21,5-22,3 ° C), влажност (47-53,1%) и условия на светлинен цикъл (12:12 h светло-тъмно); мишките имаха достъп до вода за гризачи и вода от чешмата ad libitum в продължение на 1 седмица.

Експериментален дизайн. Мишките бяха рандомизирани в следните групи (n = 9 във всяка група): нормална контролна група (NC), група с високо съдържание на мазнини (HFD), група с HFD с OLE (150 mg/kg) и HFD с гарциния ( 200 mg/kg) приложена група. Мишките са хранени с експериментални диети в продължение на 12 седмици. Телесното тегло и приема на храна от мишки се измерват веднъж седмично. Мишките се умъртвяват чрез сърдечна пункция под анестезия и кръвта и мастните им тъкани се събират за допълнителен анализ. Серумът се изолира от кръвните проби чрез центрофугиране при 200 × g в продължение на 10 минути и веднага се съхранява при –80 ° С. Мастната тъкан (епидидимална мазнина, периренална, ретроперитонеална мастна тъкан и мезентериална мазнина) от всяка мишка е събрана и претеглена. Всички експериментални процедури, включващи животни, са одобрени от институционалния комитет по грижа и употреба на животните към университета CHA (IACUC180078), а експериментите са проведени в съответствие с насоките за опити с животни.

Хистологично изследване. Епидидималната мазнина беше изплакната и фиксирана в 10% неутрално буфериран формалин, вграден в парафин и нарязан на 4-μm участъци, които бяха оцветени с хематоксилин и еозин и наблюдавани под микроскоп при увеличение 100 пъти. За измерване на диаметъра на адипоцитите се оценяват 10 произволни полета на група със софтуера Image J (NIH, Bethesda, MD, USA).

Биохимичен анализ. Серумните концентрации на общия холестерол (TC), триглицеридите (TG), холестерола на липопротеините с висока плътност (HDL), свободната мастна киселина (FFA) и глюкозата се оценяват с търговски комплекти за анализ и с помощта на автоматичен анализатор TBA-30FR Accute (Toshiba, Токио, Япония). Нивата на LDL + VLDL холестерол са изчислени чрез изваждане на нивата на HDL холестерол от общите нива на холестерола. Малко количество кръв се събира от опашната вена и нивата на лептин и адипонектин се оценяват на 4, 8 и 12 седмици с помощта на ELISA Kit за мишки/плъхове (Morinaga, Йокохама, Япония) и Adiponectin ELISA kit (FineTest, Wuhan), Китай), съответно.

Анализ на обратна транскрипция-полимеразна верижна реакция (RT-PCR). Общата РНК се извлича от хомогенизираната мастна тъкан, като се използва комплект за екстракция на Easy-BLUE Total RNA (Intron Biotechnology, Seongnam, Република Корея), съгласно инструкциите на производителя. cDNA беше синтезирана от 1 μg обща РНК с CellScript All-in-One cDNA Master Mix (CellSafe, Yongin, Република Корея) и пробите бяха анализирани в три екземпляра с HiPi PCR Premix (Elpisbio, Daejeon, Република Корея). Експресията на целевите гени се нормализира до тази на глицералдехид-3-фосфат дехидрогеназата (GAPDH). Последователностите на праймерите, използвани в това проучване, са изброени в таблица I .