(a - d) Лека микрофотография от див тип и k1-2 мутантни корени, инокулирани с R. leguminosarum щам A34 при 14 dai. а) Кърлиране на косата и микроколония в растения от див тип (WT). (b) Нормален растеж на нишка на инфекция (IT) и развитие на примордиум в растенията с WT. (в) Свиване на корен от косъм, съдържащо микроколония и развитие на подобна на торбичка ИТ в кореновата коса в корените на линията k1-2. (г) Трансцелуларен растеж на торбести IT като без бактерии се отделят корени на линията k1-2. (e - h) Лека микрофотография от див тип и k1-2 мутантни корени, инокулирани с R. leguminosarum щам A91 (nodE nodO мутант) при 14 dai. (д) ИТ блокирани в космите на корените на WT корените. (е) Развитие на ИТ и формиране на примордиум в корените на WT. (g, h) Наблюдавани са само къдрене на косата и микроколонии в корени от линията k1-2. Пръчки: (a, e) = 50 μm; (b - d) = 40 μm; (f) = 50 μm; (g, h) = 30 μm.

безплатни

(а) Брой възли и примордии на див тип тип Комер и корени на мутантна линия k1-2 по време на инокулация с набор от щамове R. leguminosarum на растение. (б) Брой възли и примордиум на див тип тип Cameor и k1-3 мутантни корени по време на инокулация с набор от щамове R. leguminosarum на растение. Част от възли в k1-3 мутант остава неинфектирана при 14 dai (53,7% за A42, 49,8% за A67 и 52,2% за A91). Мутантът k1-1 не образува възлите и примордиите и не е включен в анализа. Стойностите са средни стойности ± SEM на три биологични повторения (10 растения на вариант във всяко повторение). Стойностите са средни стойности ± SEM на три биологични повторения (10 растения на вариант във всяко повторение). Двупосочната ANOVA показва значителни разлики в броя на възлите и примордиите, в зависимост от бактериалния щам (F (df = 3) = 376,08, p p p p p p p Таблица S3 за възлите и таблица S4 за примордиума).

Анализ на развитието на реакцията на свръхчувствителност (HR) при преходната копродукция на LysM-RLKs Ps SYM10 и Ps K1 (съответстващи на протеини в див тип (wt) и k1-1, k1-2 и k1-3 мутантни линии) в Листата на N. benthamiana. (а) Развитието на HR при съвместното производство на SYM10 + K1 (wt), SYM10 + K1 (k1-2) и SYM10 + K1 (k1-3). Не е разкрита HR по време на съвместното производство на SYM10 + K1 (k1-1) (3 дни след трансформацията). Не е открит HR при съвместното производство на SYM10 + SYM19 (отрицателна контрола). (b) Western blot анализ на K1, SYM10 и SYM19 в листата на N. benthamiana с анти-GFP, анти-6xHIS и анти-3xFLAG антитела. Солюбилизираните протеини се разделят чрез гел електрофореза в присъствието на SDS и се визуализират с помощта на HRP-свързани антитела заедно с Clarity Max Western ECL субстрат (Bio Rad, USA) оцветяващи разтвори. (в) Развитието на ЧР се показва като процент (%) листа с HR (черни) и здрави (сиви) листа след инфилтрация с бактерии, приютяващи съответните конструкции. Бяха проведени три независими експеримента (10–12 растения за вариант във всеки експеримент).

Двухибридни анализи на дрожди между SYM10-ECD и K1-ECD, K1-ECD (с заместване на P169S в LysM3,), K1-ECD (със заместване на S59F в LysM1). Провежда се двухибриден анализ на дрожди, като се използват извънклетъчните домени на Ps SYM10, Ps K1 (съответстващи на протеини в дивия тип и k1-2 и k1-3 мутантни линии). Използвани са серийни разреждания OD600 = 1, 0,1 и 0,01. Растежът на дрождите в селективна среда, в която липсват левцин и триптофан (SD-LT) показва наличието и на конструкции на стръв, и на плячка. Взаимодействието беше тествано върху среда, в която липсва допълнително урацил (SD-LTU) или е допълнена с 3-амино-1,2,4-триазол (3AT) (SD-LTH + 50 mM 3AT). Като контроли, няколко двойки вектори (pEXP32/Krev1 и pEXP22/RalGDS-див тип, pEXP22/RalGDS-m1 и pEXP22/RalGDS-m2), предложени от производителя, бяха използвани за силни, слаби и неоткриваеми взаимодействия (Thermo Fisher Scientific).

(а - в) Арбускуларната микоризна гъба колонизира ефективно див тип, k1-1 и k1-2 в система за растения за медицински сестри. Нормална колонизация на арбускуларни микоризни (AM) гъби в диви видове (a), k1-1 (b) и k1-2 линии (c). Образуват се арбускули, везикули. (d - i) Конфокални микроскопски изображения на див тип (d) и мутантни k1-1 (e) и k1-2 (f) P. sativum L. коренови линии, колонизирани с R. нерегулярни. Корените при 3 dpi бяха оцветени с Alexa Fluor 488 WGA и пропидиев йодид. Белите стрелки показват клетки с арбускули, а белите върхове на стрелки са насочени към везикулите. Не са идентифицирани различни в образуването на арбускули вътре в кореновите клетки на k1-1 (h), k1-2 (i) в сравнение с дивия тип (g). Скала: (a - d, f) = 50 μm, (e) = 40 μm, (g, h) = 10 μm, (i) = 15 μm.

Модел на организацията на рецепторните комплекси в P. sativum L. и влияние на NodO и NodE върху процеса, контролиран от рецепторни комплекси [25].

Схема на сигнална трансдукция, контролирана от Ps K1/Ps SYM10 рецепторни комплекси и влиянието на NodO и мутации в k1 ген върху този процес в P. sativum L. [25].