Причинни агенти

Няколко протозойни вида от рода Entamoeba колонизират хората, но не всички от тях са свързани с болести. Entamoeba histolytica е добре разпознат като патогенна амеба, свързана с чревни и екстраинтестинални инфекции. Други морфологично идентични Entamoeba spp., Включително E. dispar, E. moshkovskii и E. bangladeshi, обикновено не са свързани със заболяване, въпреки че продължават разследванията на патогенния потенциал.

Докато обсъжданите видове са морфологично идентични, E. histolytica може да се наблюдава при погълнати червени кръвни клетки (еритрофагоцитоза); E. dispar може понякога да се наблюдава и при погълнати еритроцити, въпреки че способността му за еритрофагоцитоза е много по-малка от тази на E. histolytica. Непатогенните амеби (напр. Endolimax nana, Iodamoeba buetschlii, други видове Entamoeba) са важни, тъй като те могат да бъдат объркани с E. histolytica при диагностични изследвания.

Жизнен цикъл

dpdx

Географско разпределение

Патогенните видове Entamoeba се срещат по целия свят и често се възстановяват от прясна вода, замърсена с човешки изпражнения. Повечето случаи на амебиаза се наблюдават в развиващите се страни.

В индустриализираните страни рисковите групи включват мъже, които правят секс с мъже, пътници, скорошни имигранти, имунокомпрометирани лица и институционализирано население.

Клинично представяне

По-голямата част от инфекциите, ограничени до лумена на червата („луминална амебиаза“), са асимптоматични. Амебичен колит или инвазивна чревна амебиаза се появява при нахлуване на лигавицата. Симптомите включват тежка дизентерия и свързаните с нея усложнения. Тежките хронични инфекции могат да доведат до допълнителни усложнения като перитонит, перфорации и образуване на амебични грануломи (амебома).

Амебичните абсцеси на черния дроб са най-честата проява на екстраинтестинална амебиаза. Наблюдавани са също плевропулмонален абсцес, абсцес на мозъка и некротични лезии на перианалната кожа и гениталиите.

Зрелите кисти на Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar имат 4 ядра, които характерно имат централно разположени кариозоми и фин, равномерно разпределен периферен хроматин. Кистите обикновено измерват 12 до 15 µm.

Зрелите кисти на Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar имат 4 ядра, които характерно имат централно разположени кариозоми и фин, равномерно разпределен периферен хроматин. Кистите обикновено измерват 12 до 15 µm.

Патогенните ентомеба трофозоити имат едно ядро, които имат централно разположена кариозома и равномерно разпределен периферен хроматин. Цитоплазмата има гранулиран или „шлифован” вид. Трофозоитите обикновено измерват 15 до 20 µm (диапазон от 10 до 60 µm), като са склонни да бъдат по-продълговати при диарийни изпражнения.

Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar trophozoites имат едно ядро, което има централно разположена кариозома и равномерно разпределен периферен хроматин. Този типичен външен вид на ядрото не винаги се наблюдава, тъй като някои трофозоити могат да имат ядра с ексцентрична кариозома и неравномерно разпределен периферен хроматин. Цитоплазмата има гранулиран или „шлифован” вид. E. histolytica/E. диспар трофозоитите обикновено измерват 15 до 20 µm (диапазон от 10 до 60 µm), като са склонни да бъдат по-удължени при диарийни изпражнения.

Патогенните ентомеба трофозоити имат едно ядро, които имат централно разположена кариозома и равномерно разпределен периферен хроматин. Този типичен външен вид на ядрото не винаги се наблюдава, тъй като някои трофозоити могат да имат ядра с ексцентрична кариозома и неравномерно разпределен периферен хроматин. Цитоплазмата има гранулиран или „шлифован” вид. Трофозоитите обикновено измерват 15 до 20 µm (диапазон от 10 до 60 µm), като са склонни да бъдат по-продълговати при диарийни изпражнения.

Еритрофагоцитозата (поглъщане на червени кръвни клетки от паразита) е класически свързана с E. histolytica, но рядко може да се появи с E. dispar, поради което това не е надежден критерий, по който да се разграничат тези видове. Имайте предвид, че еритрофагоцитоза рядко се наблюдава при оцветени цитонамазки.

Лабораторна диагностика

Диференциална диагноза сред другите амеби

Патогенните видове Entamoeba трябва да се разграничават от други чревни протозои, като непатогенните амеби (Entamoeba coli, E. hartmanni, E. gingivalis, Endolimax nana, Iodamoeba buetschlii) и биччетата Dientamoeba fragilis. Морфологичната диференциация между тях е възможна, но потенциално сложна, въз основа на морфологичните характеристики на кистите и трофозоитите.

В културата различните характеристики на растеж на E. moshkovskii могат да помогнат за разграничаването му от други видове, но методите за култивиране имат важни ограничения (липсващи смесени инфекции, замърсяване, трудоемкост, ограничена наличност). В исторически план диференциацията на E. dispar и E. histolytica се основава на изоензимен или имунологичен анализ, но те вече не се предпочитат от наличието на ефективни молекулярни методи и рядко се извършват. Понастоящем се препоръчват молекулярни методи за разграничаване на патогенните видове Entamoeba.

Микроскопско откриване

Микроскопската идентификация на кисти и трофозоити в изпражненията е често срещаният метод за диагностициране на патогенни видове Entamoeba. Това може да се постигне с помощта на:

  • Пресни изпражнения: мокри крепежи и трайно зацапани препарати (напр. Трихром).
  • Концентрати от прясно изпражнение: мокри накрайници, със или без йодно оцветяване, и трайно оцветени препарати (например трихром). Въпреки че са полезни за кисти, методите за концентрация може да не са полезни за демонстриране на трофозоити.
  • Микроскопията също има ниска чувствителност, ако се анализира само една проба от изпражненията и изисква персонал, обучен в морфологична диагностика. Събирането и анализът на три последователни проби от изпражнения в рамките на десет дни подобрява шансовете за откриване. Също така, Е. dispar, E. histolytica иE. moshkovskii не се различават въз основа на морфологията.

Трофозоитите също могат да бъдат идентифицирани в аспирати или биопсични проби, получени по време на колоноскопия или операция.

Имунодиагностика

Комплекти за ензимен имуноанализ (EIA) за откриване на антитела на Entamoeba histolytica, както и комплекти за EIA за откриване на антиген се предлагат на пазара в Съединените щати. Откриването на антитела е най-полезно при пациенти с екстраинтестинално заболяване (т.е. амебичен абсцес на черния дроб), когато организмите обикновено не се откриват при изследване на изпражненията. Откриването на антитела е с ограничена диагностична стойност при пациенти от силно ендемични райони, за които е вероятно да са имали предварително излагане и сероконверсия, но може да бъде по-полезно при пациенти от райони, където патогенната Entamoeba spp. са редки. Откриването на антиген по време на активни инфекции може да бъде полезно като допълнение към микроскопската диагноза при откриване на паразити и може да прави разлика между патогенни и непатогенни инфекции.

Откриване на антитела

Тестът за непряка хемаглутинация (IHA) е заменен от предлаганите в търговската мрежа комплекти за тестове за въздействие върху околната среда за рутинна серодиагностика на амебиаза. Антигенът се състои от суров разтворим екстракт от организми, култивирани с аксен. Тестът EIA открива антитела, специфични за Е. histolytica, при приблизително 95% от пациентите с екстраинтестинална амебиаза, 70% от пациентите с активна чревна инфекция и 10% от асимптоматичните лица, които преминават кисти на E. histolytica. Ако антитела не се откриват при пациенти с остра форма на съмнение за амебичен абсцес на черния дроб, 7-10 дни по-късно трябва да се вземе втори образец. Ако вторият образец не показва сероконверсия, трябва да се обмислят други агенти. Откриваемите специфични за E. histolytica антитела могат да продължат години след успешно лечение, така че наличието на антитела не означава непременно остра или настояща инфекция. Също така пациентите, които са живели в силно ендемични райони, вероятно са серопозитивни поради минали експозиции. Специфичността е 95% или по-висока: рядко се появяват фалшиво положителни реакции.

Въпреки че се съобщава за откриване на IgM антитела, специфични за E. histolytica, чувствителността е само около 64% ​​при пациенти с текущо инвазивно заболяване. Няколко търговски комплекта EIA за откриване на антитела се предлагат в Съединените щати. Не съществуват търговски комплекти за откриване на антитела за E. dispar или E. moshkovskii или E. bangladeshi.

Откриване на антиген

Откриването на антиген може да бъде полезно като допълнение към микроскопската диагноза при откриване на паразити и за разграничаване на патогенни и непатогенни инфекции. Въпреки това, полезността е ограничена за замразени или неподвижни проби и за проби след обработка. Последните проучвания показват подобрена чувствителност и специфичност на анализите на фекални антигени с използването на моноклонални антитела, които могат да разграничат инфекции с E. histolytica и E. dispar. Предлага се поне един търговски комплект, който открива само патогенна инфекция с E. histolytica в изпражненията; налични са няколко комплекта, които откриват антигени на E. histolytica в изпражненията, но не изключват инфекции с E. dispar.

Молекулярна диагностика

Конвенционална PCR

В референтните диагностични лаборатории молекулярният анализ чрез конвенционални PCR-базирани анализи е методът на избор за различаване между E. histolytica и E. dispar. Някои анализи също могат да различат Е. moshkovskii.

PCR в реално време

PCR подходът в реално време на TaqMan е валидиран в CDC и се използва за диференциална лабораторна диагностика на амебиаза. Анализът е насочен към гена 18S rRNA с видоспецифични сонди TaqMan в дуплексен формат, което позволява да се открият както E. histolyrica, така и E. dispar в същия реакционен съд.

Препратки:
Qvarnstrom Y, James C, Xayavong M, Holloway B, Moura I, Visvesvara GS, et al. Сравнение на обосновките за PCR в реално време за диференциална лабораторна диагностика на амебиаза. J Clin Microbiol 2005; 43: 5491-5497.

Лабораторна безопасност

Кистите в нефиксирани проби на изпражненията са потенциално инфекциозни. Спазвайте стандартните предпазни мерки, които се прилагат за проби от изпражнения: https://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticprocedures/stool/safety.html.

Предложено четене

Ali, I.K.M., 2015. Чревни амеби. Клиники по лабораторна медицина, 35 (2), стр. 393-422.

Heredia, R.D., Fonseca, J.A. и López, M.C., 2012. Entamoeba moshkovskii перспективи на нов агент, който да се вземе предвид при диагностицирането на амебиаза. Acta Tropica, 123 (3), стр. 139-145.

Morán, P., Rojas, L., Cerritos, R., Zermeno, V., Valadez, A., de Oca, GM, Reyes, MA, González, E., Partida, O., Hernández, E. and Nieves, М., 2013. Кожна амебиаза: значението на молекулярната диагностика на нововъзникващо паразитно заболяване. Американското списание за тропическа медицина и хигиена, 88 (1), стр. 186-190.

Leo, M., Haque, R., Kabir, M., Roy, S., Lahlou, RM, Mondal, D., Tannich, E. и Petri, WA, 2006. Оценка на Entamoeba histolytica антиген и точка на антитела -тестове за грижа за бърза диагностика на амебиаза. Вестник по клинична микробиология, 44 (12), стр. 4569-4571.

DPDx е образователен ресурс, предназначен за здравни специалисти и лабораторни учени. За преглед, включително превенция, контрол и лечение, посетете www.cdc.gov/parasites/.

Получавайте актуализации по имейл

За да получавате актуализации по имейл за тази страница, въведете своя имейл адрес: